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1、目的:探討外周穴位電針( electroacupuncture, EA)刺激或腹腔內(nèi)注射右美托咪啶(dexmedetomidine,DEX)對(duì)Ⅱ°燒傷大鼠的鎮(zhèn)痛作用。
方法:本實(shí)驗(yàn)包括兩部分研究?jī)?nèi)容:(1)外周穴位EA對(duì)燒傷大鼠的鎮(zhèn)痛作用及初步機(jī)制;(2)腹腔內(nèi)注射DEX對(duì)燒傷大鼠的鎮(zhèn)痛作用及初步機(jī)制。實(shí)驗(yàn)一:取健康成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠60只隨機(jī)分為正常組、假燒傷組、燒傷組、燒傷+EA組、燒傷+假E
2、A組共5組,每組均為12只,建立Ⅱ°燒傷疼痛大鼠模型;在外周穴位給予多次EA刺激;觀察燒傷建模及EA前后各組大鼠疼痛行為學(xué)變化;電子von Fray纖維檢測(cè)各組大鼠在燒傷前后0、12、24、36、48、60和72h時(shí)間點(diǎn)機(jī)械痛閾值;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)燒傷后48h時(shí)間點(diǎn)各組大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)( periaqueductal gray,PAG)中膠質(zhì)細(xì)胞源性纖維酸性蛋白(glia fibrillary acidic protein, G
3、FAP)的表達(dá)變化。實(shí)驗(yàn)二:取健康成年雄性Sprague Dawley(SD)60只大鼠隨機(jī)分為正常組、假燒傷組、燒傷組、燒傷+DEX1組、燒傷+DEX2組共5組,每組均為12只,建立Ⅱ°燒傷疼痛大鼠模型;對(duì)燒傷疼痛大鼠給予腹腔注射DEX(5μg或10μg);觀察燒傷建模及腹腔注射DEX前后各組大鼠疼痛行為學(xué)變化;電子von Fray纖維檢測(cè)各組大鼠在燒傷前后0、12、24、36、48、60和72h時(shí)間點(diǎn)機(jī)械痛閾值;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)燒
4、傷后48h時(shí)間點(diǎn)各組大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(periaqueductal gray,PAG)中P2X3受體蛋白表達(dá)的變化。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:假燒傷組大鼠在各觀察時(shí)間點(diǎn)其機(jī)械痛閾值與正常組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其PAG中GFAP表達(dá)與正常組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);燒傷組大鼠在燒傷建模后12h機(jī)械痛閾顯著下降伴PAG中GFAP陽(yáng)性表達(dá)上調(diào),與正常組大鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均﹤0.001),在燒傷
5、后48h機(jī)械痛閾值下降到最低值其后有小幅回升,但與正常組比較,差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.001);燒傷+EA組大鼠經(jīng)多次外周穴位 EA治療后,在各觀察時(shí)間點(diǎn)其機(jī)械痛閾值與單純燒傷組比較升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.001);免疫組化檢測(cè)提示:燒傷+EA組大鼠經(jīng)EA治療后PAG中GFAP表達(dá)上調(diào),與單純燒傷組大鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.001)。燒傷+假EA組大鼠在燒傷前后各檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)其機(jī)械痛閾值與單純燒傷組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意
6、義(P>0.005),其PAG中GFAP表達(dá)與與單純燒傷組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)二:假燒傷組大鼠在各觀察時(shí)間點(diǎn)其機(jī)械痛閾值與正常組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其 PAG中 P2X3受體表達(dá)與正常組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);燒傷組大鼠在燒傷建模后12h機(jī)械痛閾顯著下降伴PAG中P2X3受體表達(dá)上調(diào),與正常組大鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均﹤0.001),在燒傷后48h機(jī)械痛閾值下降到最低值其后
7、有小幅回升,但與正常組比較,差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.001);燒傷+DEX1組、燒傷+DEX2組大鼠經(jīng)腹腔注射DEX治療后,機(jī)械痛閾值升高,在各觀察時(shí)間點(diǎn)與單純燒傷組大鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.001);免疫組化檢測(cè)提示:燒傷+DEX1組、燒傷+DEX2組大鼠PAG中P2X3受體表達(dá)增加,與單純燒傷大鼠比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.001)。燒傷+DEX1組、燒傷+DEX2大鼠在各觀察時(shí)間點(diǎn),其機(jī)械痛閾值和PAG中P2X3受體
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