合歡對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞株的增殖抑制與凋亡誘導(dǎo)作用.pdf

1、腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤(glioma)是發(fā)生于神經(jīng)元外胚層的腫瘤，占顱內(nèi)腫瘤的50％左右，是顱內(nèi)最常見的原發(fā)性惡性腦腫瘤，其中位生存期僅9～12個(gè)月。世界衛(wèi)生組織(WHO)1998年公布的按死亡率順序排位，惡性膠質(zhì)瘤是34歲以下腫瘤患者的第2位死亡原因，是35～54歲患者的第3位死亡原因。腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特征是呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，其惡性程度高，生長(zhǎng)快，病程短，具有發(fā)病率、復(fù)發(fā)率、死亡率高和治愈率低等“三高一低”的特點(diǎn)，因此尋找有效的膠質(zhì)瘤治療方案及

2、方法具有重要的意義。在臨床實(shí)踐中，一方面由于神經(jīng)膠質(zhì)瘤多發(fā)生于腦的重要功能區(qū)及其附近，與正常腦組織沒有明顯界限，手術(shù)往往難以將腫瘤全部切除或根本無法切除。另一方面，放療?？墒鼓[瘤及病灶周圍的正常組織受到放射線的損傷。因此尋找安全、有效且毒副作用小的治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物就顯得十分重要。中醫(yī)中藥由于其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，近年來被廣泛應(yīng)用于癌癥的預(yù)防和治療。
　　本文分別對(duì)半枝蓮、萹蓄、合歡花、合歡皮、柴胡、天南星、蛇舌草、旋覆花、梔子9種中草

3、藥進(jìn)行了水提、真空抽濾、減壓濃縮，然后將濃縮后的組分進(jìn)行冷凍干燥，即得它們的水提物。以得到的干物質(zhì)對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞株進(jìn)行細(xì)胞增殖活性檢測(cè)，結(jié)果顯示:上述粗提物中，僅合歡花、合歡皮兩種水提物能較好地抑制C6細(xì)胞的增殖?；谏鲜鰧?shí)驗(yàn)事實(shí)，我們進(jìn)一步研究了合歡花、合歡皮兩種水提物對(duì)C6細(xì)胞株的凋亡誘導(dǎo)作用及對(duì)細(xì)胞周期分布的影響，并對(duì)合歡皮粗提物進(jìn)行了萃取分離，以尋找有效抗癌組分。所得結(jié)論如下:
　　1.合歡花、合歡皮兩種藥物的水提

4、物均可抑制C6細(xì)胞的增殖，且對(duì)C6細(xì)胞的增殖抑制作用具有量效和時(shí)效依賴關(guān)系。合歡花水提物在24h、48h、72h時(shí)，對(duì)C6細(xì)胞的半數(shù)抑制率(IC50)分別為:305μg/mL、145μg/mL、15μg/mL;合歡皮水提物在24h、48h、72h時(shí)，對(duì)C6細(xì)胞的半數(shù)抑制率(IC50)分別為:265μg/mL、195μg/mL、95μg/mL。
　　2.合歡花、合歡皮兩種藥物的水提物均可誘導(dǎo)C6細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡。與對(duì)照組細(xì)胞相比，濃

5、度分別是200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL的合歡花水提物處理C6細(xì)胞24 h后，細(xì)胞凋亡率分別增加了1.4％、3.4％、13.3％;濃度分別是200μg/mL、250μg/mL的合歡皮水提物處理C6細(xì)胞24h后，細(xì)胞凋亡率分別增加了2.1％、13.7％。
　　3.合歡花、合歡皮兩種藥物的水提物均可使C6細(xì)胞發(fā)生S期阻滯。濃度是300μg/mL、400μg/mL的合歡花水提物處理C6細(xì)胞24h后，S期細(xì)胞比例由對(duì)照

6、組的32.169％分別增加到46.990％、49.623％;濃度是300μg/mL、400μg/mL的合歡皮水提物處理C6細(xì)胞24h后，S期細(xì)胞比例由對(duì)照組的30.107％分別增加到39.910％、45.395％。
　　4.依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇對(duì)合歡皮粗提物進(jìn)行了萃取分離，分別將冷凍干燥后的合歡皮粗提物、石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相以及殘留水相6類組分對(duì)C6細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞增殖活性檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示:僅殘留水