ELT對人工膝關節(jié)置換術后早期深部感染的新輔助治療作用及相關機制研究.pdf

1、研究背景：全膝關節(jié)置換（TKA）術后感染是導致手術失敗的“災難性”并發(fā)癥，臨床診斷與治療十分棘手。近年來，隨著人工關節(jié)手術技術的提高及現代無菌技術的普及，術后感染率明顯下降，但隨著人工關節(jié)置換手術的不斷增加，術后感染的絕對人數仍然較多，而且耐藥菌感染不斷增多。目前治療人工全膝關節(jié)置換術后深部感染的金標準是：取出假體、徹底清創(chuàng)、膝關節(jié)內放置抗生素骨水泥間隙墊、全身應用抗生素和二期植入新的假體。但需要全身應用抗生素治療6周以上才能較好地解決

2、感染復發(fā)的問題，而長時間大量應用抗生素可造成患者肝腎功能的損害和細菌耐藥等一系列問題，同時也給患者和社會帶來沉重的經濟負擔。因此開展TKA術后感染的預防、早期診斷、治療方式的選擇與改良、尋找新型抗生素給藥方法等一系列課題成為廣大關節(jié)外科醫(yī)生需要攻克的一個個難關。ELT（Endolymphatic Therapy，即淋巴管內介入療法）在抗菌治療方面具有直接殺滅細菌和免疫調節(jié)的雙重作用，同時具有減少抗生素用量和縮短用藥時間的優(yōu)勢，其為臨床T

3、KA術后感染的防治提供了新思路。
　　目的：明確ELT抗生素輔助治療TKA術后早期感染的可行性與優(yōu)越性，探討其抗感染的可能分子機制。
　　方法：1.采用螺旋 CT三維掃描重建、計算機輔助設計（CAD）、快速成型技術（3D打?。┰O計并制作不同型號兔解剖型人工膝關節(jié)假體。2.隨機選取體重2.0~3.5kg成年健康新西蘭大白兔40只，雌雄不限，隨機分為4組，分別為：對照組（Contrast）、模型組（Model）、靜脈治療組（In

4、travenous）和淋巴管介入治療組（ELT），每組各10只。4組動物均行單膝TKA手術。術后2周待手術切口愈合良好，將濃度為1×105cfu金黃色葡萄球菌（SA）細菌液接種致Model組、Intravenous組及ELT組動物手術側膝關節(jié)腔內，1周后取3組動物膝關節(jié)液，行細菌培養(yǎng)與鑒定，確認感染模型。將 Model組、Intravenous組及ELT組3組動物行膝關節(jié)翻修手術，既徹底清創(chuàng)、拔除假體、植入含萬古霉素的股骨與脛骨骨水泥占

5、位器，Contrast組單純切開沖洗后縫合。3.術后Contrast組和Model組動物經耳緣靜脈輸注生理鹽水，每天一次，每次5.0ml/kg，共28次；Intravenous組經耳緣靜脈微泵輸注萬古霉素注射液（濃度為：0.5g/100ml），每天一次，每次5.0ml/kg，共28次；ELT組經ELT輸注裝置淋巴管或淋巴結內泵入與Intravenous組濃度相同的萬古霉素注射液，劑量為靜脈組1/2，每次2.5ml/kg，第一天每12小時

6、一次，然后每天一次，連續(xù)7天，最后改為隔天一次，共5次，總共19次。4.翻修術后第0、2、5、9、14、20、28天抽取各組兔外周血，行ESR與CRP檢測；翻修術后4周處死各組動物行關節(jié)液培養(yǎng)，分別取膝關節(jié)骨、滑膜及腘窩淋巴結組織行 HE染色，采用免疫組化染色與RT-PCR檢測上述組織中IL-1β、TNF-α、NF-κB、p38MAPK的表達。
　　結果：1.采用螺旋CT三維掃描重建、計算機輔助設計（CAD）、快速成型技術（3D打

7、印）設計與制作出不同型號兔解剖型人工膝關節(jié)假體，并成功建立與臨床接近的兔 TKA術后早期感染模型、翻修模型。2.翻修術后 Contrast組ESR、CRP數值隨時間無明顯變化，保持在與術前接近的正常水平；Model組翻修術后 ESR、CRP數值均有明顯下降，但約5天后又恢復至較高水平；Intravenous組中ESR、CRP數值隨著用藥時間增加，均有顯著下降（P<0.05），ELT組也均有下降（P<0.05），ELT組各數值下降速度與幅

8、度明顯快于Intravenous組（P<0.05）。3.翻修術后4周，免疫組化染色結果顯示：Intravenous組與ELT組骨組織的IL-1β、TNF-α、NF-κB、p38MAPK的 MD值比較均無差異（P＞0.05）；滑膜和淋巴結的 IL-1β、TNF-α、NF-κB的MD值比較有顯著差異（P<0.05），但在p38MAPK的比較無差異（P＞0.05）。4.翻修術后4周，RT-PCR結果顯示：Intravenous組與ELT組骨、

9、滑膜及腘窩淋巴結組織的IL-1β、TNF-α、NF-κB比較均有顯著差異（P<0.05），但p38MAPK的比較均無差異（P＞0.05）。
　　結論：1.采用螺旋CT三維掃描重建、計算機輔助設計、快速成型等技術可研發(fā)與臨床接近的兔解剖型人工膝關節(jié)假體，其手術植入方法簡單，術后功能良好，適用于人工膝關節(jié)置換手術的相關基礎研究。2. ELT抗生素輔助治療TKA術后早期感染方法可行，與傳統靜脈輸注抗生素方法比較具有減少抗生素用量與縮短用