奧拉西坦在蛛網膜下腔出血中治療作用及機制探討.pdf

1、蛛網膜下腔出血（subarachnoidhemorrhage，SAH）是指各種原因引起腦血管突然的破裂，血液留至蛛網膜下腔的統(tǒng)稱，分自發(fā)性和外傷性兩類，其中70％-80％的疾病屬于外科范疇。它并不是一種疾病，而屬于某些疾病的臨床癥狀。蛛網膜下腔出血后繼發(fā)腦血管痙攣發(fā)生率約為70％。如繼發(fā)有血管痙攣發(fā)生，則SAH后2周內的死亡率較未發(fā)生血管痙攣者可增加1.5-3倍。影像學上表現腦動脈狹窄及狹窄動脈遠端腦區(qū)的血流灌注減少，臨床亦有相應的缺血

2、表現。而神經細胞在腦血管痙攣后維持正常功能降低凋亡發(fā)生依賴于腦循環(huán)儲備力、腦代謝儲備力兩方面。目前臨床主要為尼莫地平抗血管痙攣及3H治療改善腦循環(huán)來降低死亡率；但在如何改善神經細胞代謝方面來輔助治療降低神經細胞壞死及凋亡方面尚缺少研究報道。奧拉西坦(Oxiracetam)ORC化學名為：2-（4-羥基吡咯烷-2-酮-1-基）乙酰胺，是一種新的環(huán)狀GABOB衍生物。是一種能夠促進學習，增強記憶力，保護受損神經細胞的新型中樞神經系統(tǒng)藥物，可

3、選擇性的作用于大腦皮層和海馬激活保護或延伸神經細胞的功能恢復，近十年來，國內外應用奧拉西坦治療各種病理狀態(tài)下的顱腦損傷，缺氧和慢性腦功能不全等取得了良好的療效。硼鹵神經細胞的藥理作用被證實，闡明的作用機制包括以下幾方面：ORC通過血腦屏障對特異性中樞神經通路發(fā)揮刺激作用，能有效提高大腦對氧的利用能力；促進磷脂酰膽堿和磷脂酰乙酰胺的合成；激活腺苷酸激酶，使ATP合成增加，提高ATP轉化（即葡萄糖的代謝率），激活糖酵解，腦缺血時可增加葡萄糖

4、的利用，促進腦細胞能量代謝，增加腦內ATP形成及轉運，提高腦細胞ATP/ADP的比值：降低腦血管阻力，抑制血小板聚集，改善微循環(huán)，增加腦組織血流量；促進受損神經細胞可塑性修復；降低興奮性氨基酸的神經毒性作用。目前臨床上在蛛網膜下腔出血(subarachnoidhemorrhage，SAH)的治療中作為腦保護劑來改善預后常有應用。多項研究表明了抑制凋亡便可以發(fā)揮腦保護作用，因此本研究通過建立大鼠SAH模型來觀測海馬神經元凋亡情況，并探討奧

5、拉西坦對神經元凋亡的影響，目的在于為臨床上防治SAH后的腦損傷提供理論依據。細胞凋亡是在細胞內外特定的生理或病理性因素的誘導下發(fā)生細胞程序化的死亡。目前研究表明，細胞內的基因控制著細胞凋亡的發(fā)生和發(fā)展。細胞外部因素通過信號轉導來影響這些基因的表達或者其表達產物的活化，從而間接地調控細胞發(fā)生凋亡。有關凋亡機制的研究有很多，不同種類、不同生長發(fā)育階段的細胞有其不同的細胞凋亡路徑，但是這種不同主要表現在其早期誘發(fā)凋亡的分子機制有差別很大，但是

6、凋亡一起始，不同的早期凋亡信號都會匯集到一條共同的執(zhí)行路徑上，導致細胞產生相似的特征性的形態(tài)學和生化改變，而目前研究表明Caspase-3是Caspase家族中重要的一員，且被證實處于凋亡執(zhí)行通路的下游，是各種凋亡通路中的共同下游效應部分，它直接或間接酶解一系列細胞存活所必需的功能蛋白，引起細胞凋亡。Bcl-2家族在神經細胞的凋亡抑制過程中是一個重要的凋亡抑制基因，Bcl-2蛋白可以通過降低細胞內及細胞核內Bax的濃度，直接通過影響線粒

7、體外膜通透性的改變來阻止凋亡信號的轉導。Bax是一種主要的促凋亡基因，其誘導凋亡的機制是通過Bax同源二聚體的形成來完成，Bcl-2蛋白的抑制凋亡需要通過與Bax結合形成異源二聚體來實現，Bcl-2/Bax組成一個相對平衡體系，Bax過表達時就表現細胞凋亡加速，Bcl-2過表達時就表現細胞凋亡被抑制，Bcl-2/Bax的比率決定了細胞凋亡是否發(fā)生。其作用機制經研究證實為Bax參與線粒體膜結構的變化，并與Cyte-c的釋放相關密切。在凋亡

8、因素的刺激下，Cyte-c的釋放和分布受Bax等因素的調控。釋放入胞質中的Cvte-c在ATP或dATP的輔助作用下引發(fā)Caspase家族的活化來誘導凋亡的發(fā)生。
　　 [方法]選擇成年雄性Wistar大鼠35只，采用新鮮自體股動脈血枕大池二次注入法來建立大鼠SAH模型，將大鼠隨機分配為空白對照組、生理鹽水對照組、SAH組、奧拉西坦注射液治療1組、奧拉西坦注射液治療2組，每組7只，以上各組于術后14天處死，用Real-TimeP

9、CR技術檢測海馬神經組織中凋亡因子Caspase-3和Bax以及抗凋亡因子Bcl-2在各組的變化情況，并用Westernblot進一步來驗證此變化。
　　 [結果]SAH后可引起海馬神經組織中Caspase-3和Bax的表達較對照組均有不同程度上升（P＜0.01），同時Bcl-2表達也有所上升（P＜0.01），均有統(tǒng)計學差異。奧拉西坦注射液治療1組及2組Caspase-3的表達較SAH組有下降（P＜0.01），奧拉西坦注射液治療