辛伐他汀和福辛普利對慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化及TGF-β1和CTGF表達的影響.pdf

1、慢性心力衰竭(ChronicHeartFailure,CHF)是各種心血管疾病的終末階段。隨著我國老齡化社會的到來,患病率越來越高。同時新治療觀念也隨著對CHF發(fā)生機制的研究深入而不斷提出。研究發(fā)現有效抑制神經內分泌-細胞因子系統(tǒng)通過信號傳導途徑和細胞凋亡過程所導致的心室重構,對CHF的治療和預后方面具有重要意義,其中轉化生長因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)和結締組織生長因子(conne

2、ctivetissuegrowthfactor,CTGF)與纖維化的關系近年來引起了人們的關注。他汀類藥物是羥甲基戊二酰輔酶A(hydroxy-methyl-glutarylcoenzymeA,HMG-CoA)還原酶抑制劑,研究發(fā)現在治療CHF過程中具有與降脂作用無關的抗心肌纖維化作用,但是其療效是否與被稱為治療CHF基石的ACEI類藥相同及二者聯合應用的療效是否優(yōu)于單獨用藥的報道甚少,本研究旨在探討在相同條件下比較辛伐他汀與福辛普利單

3、用及聯合應用對慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化的影響及分子機制。
　　目的:
　　采用腎上腹主動脈縮窄方法建立CHF心肌纖維化的動物模型,采用免疫組織化學染色、Western-blot、RT-PCR方法,從細胞水平和分子水平觀察TGF-β1和CTGF在辛伐他汀組、福辛普利組及聯合用藥組中的表達情況,探討用藥組之間抗心肌纖維化的療效及分子機制。
　　方法:
　　1.清潔級雄性Wistar大鼠60只,隨機抽取10只作為假手

4、術組,其余大鼠全部采用腎上腹主動脈縮窄術制作CHF模型。以左室舒張末壓(leftventricularenddiastolicpressure,LVEDP)≥15mmHg作為成模標準。待模型建立成功后,將剩余大鼠隨機分為4組,模型組、辛伐他汀組、福辛普利組、聯合用藥組(辛伐他汀+福辛普利),每組10只。假手術組只做分離不結扎。
　　2.各組大鼠到達觀察終點時,采用多導電生理記錄儀檢測血流動力學參數LVEDP及左室內壓上升、下降最大

5、速率(leftventricularpressureriseandfall,±dp/dtmax),取左心室并計算左心室質量指數(theleftventricularmassindex,LVMI)。
　　3.采用蘇木素-伊紅(HE)染色和Masson染色法觀察各組大鼠左心室心肌組織病理學改變,并檢測左心室心肌膠原容積分數(collagenvolumefraction,CVF)。
　　4.采用透射電鏡觀察各組大鼠左心室心肌組織超

6、微結構。
　　5.采用SP免疫組織化學染色法檢測各組大鼠左心室心肌組織TGF-β1和CTGF表達。
　　6.Westen-blot檢測各組大鼠左心室心肌組織中TGF-β1和CTGF蛋白表達水平。
　　7.采用RT-PCR法檢測各組大鼠左心室心肌組織TGF-β1和CTGFmRNA表達水平。
　　結果:
　　1.各組大鼠的血流動力學參數:模型組、辛伐他汀組、福辛普利組、聯合用藥組和假手術組大鼠LVEDP,±dp

7、/dtmax分別為(18.66±1.54)mmHg,(2840±189.63)mmHg,(4098.78±289.77)mmHg;(11.44±1.88)mmHg,(4568.34±306.11)mmHg,(3654.55±105.45)mmHg;(10.58±1.90)mmHg,(4633.37±267.35)mmHg,(3702.94±198.86)mmHg;(7.46±1.64)mmHg,(4787.65±270.32)mmHg,

8、(4034.54±134.74)mmHg;(4.43±1.21)mmHg,(5156.20±298.56)mmHg,(4350.34±168.76)mmHg。模型組與假手術組相比±dp/dtmax顯著下降(P<0.01),LVEDP顯著上升(P<0.01),與模型組相比較,辛伐他汀組、福辛普利組和聯合用藥組±dp/dtmax顯著上升(P<0.01),LVEDP顯著下降(P<0.01),以聯合用藥組改變最為顯著(P<0.01)。
　

9、　2.各組大鼠LVMI和CVF:模型組、辛伐他汀組、福辛普利組、聯合用藥組和假手術組大鼠LVMI和CVF分別為(2.90±0.23)‰,(33.45±2.09)％;(2.41±0.20)‰,(17.67±1.32)%;(2.53±0.16)‰,(15.86±1.42)%;(2.05±0.22)‰,(12.05±1.3)%;(1.62±0.15)‰,(8.72±1.22)%。模型組與假手術組相比LVMI和CVF明顯上升(P<0.01),與

10、模型組相比較,辛伐他汀組、福辛普利組和聯合用藥組LVMI和CVF明顯下降(P<0.01),以聯合用藥組改變最為顯著(P<0.01)。
　　3.各組大鼠左心室心肌組織病理學改變HE染色:假手術組心肌細胞結構清晰、排列整齊、連接緊密;模型組心肌細胞結構疏松且有斷裂、排列紊亂、炎細胞增多,有明顯出血壞死;辛伐他汀組,福辛普利組和聯合用藥組心肌細胞損害較模型組顯著減輕,其中以聯合用藥組改變最為顯著。Masson染色:假手術組無明顯的膠原沉

11、積;模型組可見大片藍色的心肌膠原沉積于心肌細胞及血管周圍;辛伐他汀組,福辛普利組和聯合用藥組見少量的膠原沉積,以聯合用藥組最少。
　　4.各組大鼠左心室心肌細胞超微結構觀察假手術組大鼠心肌肌原纖維排列整齊,細胞器結構正常,心肌間質極少有膠原纖維沉積。模型組心肌肌原纖維排列整齊紊亂,細胞器損傷嚴重,心肌間質有較多的膠原纖維沉積。用藥組上述表現明顯改善,以聯合用藥組改變最為顯著。
　　5.各組大鼠左心室心肌組織TGF-β1和CT

12、GF的表達假手術組未見明顯陽性反映,模型組可見大量棕黃色顆粒呈強陽性反應,辛伐他汀組,福辛普利組和聯合用藥組棕黃色顆粒表達明顯減少,以聯合用藥組陽性反應最弱。
　　6.各組大鼠左心室心肌組織TGF-β1和CTGF表達水平模型組TGF-β1和CTGF蛋白及mRNA水平與假手術組相比均明顯上升(P<0.01),辛伐他汀組,福辛普利組和聯合用藥組TGF-β1和CTGF蛋白及mRNA水平與模型組相比均明顯降低(P<0.01),辛伐他汀組與