mir-143抑制胰腺癌的轉(zhuǎn)移及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的:胰腺癌的特點(diǎn)是早期出現(xiàn)侵襲轉(zhuǎn)移和高死亡率。本課題研究了miR-143在胰腺癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用及其初步機(jī)制。
　　方法:本課題選取胰腺癌Panc-1細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)。miR-143的表達(dá)通過(guò)腺病毒載體的miR-143表達(dá)框建立(Ad-miR-143)?；虻膍RNA和蛋白表達(dá)水平分別通過(guò)RT-PCR和Western blot檢測(cè)。Rho GTP酶的活性測(cè)定則通過(guò)pull down分析。miR-143在胰腺癌Panc-1細(xì)胞遷

2、移和侵襲中的作用在體外檢測(cè)。miR-143的抗胰腺癌轉(zhuǎn)移作用在Panc-1細(xì)胞的原位肝臟轉(zhuǎn)移模型中試驗(yàn)。miR-143的抗腫瘤生長(zhǎng)作用在Panc-1細(xì)胞的皮下移植瘤模型中試驗(yàn)。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)證實(shí)了ARHGEF1(GEF1)，ARHGEF2(GEF2)和K-RAS基因是miR-143的作用靶點(diǎn)。 miR-143的表達(dá)顯著降低了GEF1，GEF2，和K-RAS基因的mRNA和蛋白表達(dá)水平;顯著降低了其組成的RhoA，Rac1和Cdc

3、42 GTP酶的活性;顯著降低了MMP-2，MMP-9的蛋白水平;但顯著增加了E-cadherin的蛋白表達(dá)水平。體外實(shí)驗(yàn)，miR-143的表達(dá)顯著抑制了Panc-1細(xì)胞的遷移和侵襲;體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，miR-143的表達(dá)顯著抑制了肝轉(zhuǎn)移灶，和皮下移植腫瘤的生長(zhǎng)。
　　結(jié)論: miR-143在胰腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要的作用，miR-143的失（低）表達(dá)可能是導(dǎo)致胰腺癌高度侵襲性和轉(zhuǎn)移性的重要原因，miR-143是胰腺癌的一個(gè)極具