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1、為了探討熱療及熱化療聯(lián)合對(duì)大腸癌細(xì)胞株粘附分子表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響以及了解熱療對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程的分子生物學(xué)改變?cè)撗芯渴紫扔妹庖呓M織化學(xué)方法在HT29,HCT-8,LoVo,T84和SW620等人類大腸癌細(xì)胞株中篩選表達(dá)粘附因子ICAM-1、CD44V6、E-Cadherin及nm23的細(xì)胞株.將體外培養(yǎng)的人類大腸癌細(xì)胞株HT-29、HCT-8及LoVo.于實(shí)驗(yàn)室模擬熱療條件(單純水浴43℃,60分鐘)加以處理.用免疫組織化學(xué)檢測(cè)大腸癌細(xì)胞
2、株中ICAM-1、CD44V6及E-Cadherin蛋白表達(dá)的改變.利用RT-PCR了解細(xì)胞株中粘附因子mRNA轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)情況;采用流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)大腸癌細(xì)胞株中細(xì)胞凋亡(DNA倍體,早期凋亡).用絲裂霉素以及熱化療聯(lián)合處理HT-29、HCT-8及LoVo等細(xì)胞并利用上述方法同樣觀察蛋白質(zhì)表達(dá)的變化,mRNA轉(zhuǎn)錄水平改變以及細(xì)胞凋亡情況.共設(shè)計(jì)四個(gè)實(shí)驗(yàn)組:熱療前,熱療后(0h,2h,4h,8h,12h,24h,48,72h),化療以及熱
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