火菇素結(jié)構(gòu)及抗腫瘤活性的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文火菇素結(jié)構(gòu)及抗腫瘤活性的初步研究姓名:劉同軍申請學(xué)位級別:博士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:張長鎧2002.10.1319873,誤差為01%001%。目前火菇素還沒有簡便易行的檢測方法,不利于在提取過程中對其跟蹤?;鸸剿赜肍reund完全佐劑乳化后注射到新西蘭白兔體內(nèi),經(jīng)數(shù)次加強免疫后采血并分離了抗血清,免疫雙擴散顯示它能與火菇素形成免疫沉淀線,當(dāng)抗原濃度為lm∥mL時,抗血清效價在1:16以上。根據(jù)火茹素在血清平板上免

2、疫單向瓊脂擴散的結(jié)果,建立了不同濃度火菇素免疫反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,可用于火菇素的定量檢測。然后據(jù)此對在4。C下保存的火菇素進(jìn)行了長期跟蹤檢測,結(jié)果表明,在保存過程中火菇素的活性逐步降低,同時其二級結(jié)構(gòu)也被破壞,火菇素比較容易長期保存。3火菇素經(jīng)SDSPAGE后,進(jìn)行膠內(nèi)原位酶切,利用MALDI—TOF—MS分析肽指紋圖譜得到12個大小不同的肽段,檢索NCBI蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫,知火菇素為~新蛋白。為闡明火菇素蛋白的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系并揭示抗癌機理,

3、使其更好地發(fā)揮I腦床作用,用多種光譜測定了火菇素的構(gòu)象。包括紫外光譜、紅外光譜、圓二色譜、顯微共焦拉曼光譜等,并用蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)解析程序分析了火菇r素的溶液二級結(jié)構(gòu)。f火菇素的紫外吸收結(jié)果表明,其最大吸收波長在276278tun處,最小吸收波長在249252nlTl處;紅外吸收圖中,在3300、2900、1650、1500、1400cm。處出現(xiàn)數(shù)個強吸收峰?;鸸剿剡h(yuǎn)紫外圓二色性的研究表明。其水溶液在208rim處表現(xiàn)為寬大負(fù)峰,最大平均

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