B7-H4分子在腸癌細胞和間質浸潤淋巴細胞表達的臨床意義和作用研究.pdf

1、負性共刺激分子B7-H4是2003年最新發(fā)現(xiàn)的B7家族的新成員。人B7-H4mRNA在正常組織中普遍表達，而B7-H4蛋白在正常組織中基本不表達。然而近年研究顯示，在多種腫瘤細胞如卵巢癌，胰腺癌，胃癌，腎癌細胞以及腫瘤浸潤免疫細胞上發(fā)現(xiàn)有B7-H4的異常表達，提示正常組織能夠在轉錄后水平對B7-H4的表達進行嚴格調控，而在腫瘤環(huán)境中這種調控機制受到抑制或發(fā)生改變。B7-H4能夠抑制CD3+T細胞浸潤，并誘導活化CTL凋亡，削弱機體的抗腫

2、瘤免疫應答。同時，B7-H4分子還能保護腫瘤細胞逃避免疫監(jiān)視，為腫瘤免疫逃逸提供必要條件。臨床研究表明，B7-H4在腫瘤組織中表達與患者臨床病理參數(shù)密切相關，且高表達B7-H4患者往往預后較差，生存率降低。隨著對B7-H4的深入研究，其作為負性共刺激分子在腫瘤免疫中的作用越來越受到關注。
　　 本研究通過檢測腸癌標本B7-H4的表達以及T細胞、TAM的浸潤，分析腸癌組織B7-H4表達的臨床意義，并結合體外相關實驗，進一步探討B(tài)7

3、-H4在腸癌細胞及浸潤淋巴細胞表達的意義和作用。
　　 第一部分負性共刺激分子B7-H4在結直腸癌和微環(huán)境中的表達及臨床意義
　　 [目的]分析人結直腸癌組織中腫瘤細胞及腫瘤浸潤淋巴細胞（Tumor-infiltrating lymphocyte，TIL）負性共刺激分子B7-H4的表達以及巨噬細胞、T淋巴細胞及其亞群在腫瘤微環(huán)境中的浸潤，進而探討其相關臨床意義。
　　 [方法]采用免疫組化SP法檢測98例人結直腸

4、癌組織中腫瘤細胞及浸潤淋巴細胞上B7-H4的表達以及巨噬細胞、T細胞及其亞群的浸潤，統(tǒng)計學分析B7-H4的表達與患者臨床病理參數(shù)、預后、腫瘤相關巨噬細胞(Tumor-associated macrophage，TAM)以及CD3+、CD8+T細胞浸潤程度的相關性。
　　 [結果]結直腸癌組織中異常表達B7-H4分子，而正常組織中基本不表達，并且在腫瘤細胞及浸潤淋巴細胞上均檢測到B7-H4的表達。統(tǒng)計學分析表明，浸潤淋巴細胞B7-

5、H4的表達水平與患者年齡、有無淋巴結轉移、是否為粘液腺癌有關(P＜0.5)，與患者總體生存率呈負相關(P＜0.05)，且B7-H4高表達組織較B7-H4低表達組織CD3+T細胞高度浸潤例數(shù)顯著增加(P＜0.5);腸癌細胞中B7-H4的表達與患者腫瘤分期、淋巴結轉移、有無遠處轉移以及Duke's分期有關(P＜0.5)。
　　 [結論]人結直腸癌患者的腸癌細胞及浸潤淋巴細胞均異常表達B7-H4分子，CD3+T細胞的浸潤程度與浸潤淋巴

6、細胞B7-H4的表達呈顯著相關而與腫瘤細胞上B7-H4的表達無關。而腫瘤細胞表達B7-H4與腫瘤分期、淋巴結轉移、有無遠處轉移以及Duke's分期相關。上述結果提示腫瘤細胞表達B7-H4與浸潤淋巴細胞表達B7-H4可能分別以不同機制參與了腫瘤的發(fā)生和進展，且對進一步分析腫瘤組織中B7-H4在不同細胞表達的生物學和臨床意義具有重要的價值。
　　 第二部分 B7-H4分子在腫瘤細胞及單核巨噬細胞表達作用的研究
　　 [目的]

7、檢測表達B7-H4的單核巨噬細胞株U937與活化T細胞共培養(yǎng)后對T細胞增殖的影響以及表達B7-H4的腫瘤細胞在抗腫瘤藥物作用下的增殖凋亡情況，分析B7-H4在腫瘤細胞及TAM上表達的可能作用。
　　 [方法]從健康人外周血分離PBMC，免疫磁珠分選其中的T細胞，然后以單核巨噬細胞株U937與活化T細胞共培養(yǎng)檢測T細胞的增殖凋亡情況;以抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶干預293/B7-H4細胞株后檢測293細胞的增殖凋亡情況。
　　

8、 [結果]表達B7-H4的U937能抑制T細胞活化增殖并誘導其凋亡;表達B7-H4的293細胞能抵抗或部分抵抗抗腫瘤藥物的增殖抑制及誘導凋亡。
　　 [結論]表達B7-H4的U937能抑制T細胞活化增殖并誘導其凋亡，提示B7-H4在單核巨噬細胞上的表達可能通過抑制T細胞的增殖并誘導其凋亡從而發(fā)揮負性調控作用;表達B7-H4的293細胞能抵抗或部分抵抗抗腫瘤藥物的增殖抑制及誘導凋亡，提示B7-H4在腫瘤細胞上的表達可能通過增強自身