腺病毒攜帶的反義細胞外信號調節(jié)激酶-2基因治療減緩移植物血管和腎臟的慢性排斥反應.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分大鼠反義細胞外信號調節(jié)激酶-2腺病毒載體的構建 目的：正義基因反向克隆法構建大鼠anti-ERK2腺病毒載體。 方法：酶切質粒p3XFLAG-CMV7.1-ERK2，得到ERK2cDNA片段，連接到T載體進行測序，經測序正確反向克隆法插入質粒pShuttle中，最后轉入AdEasy(tm)XLAdenoviralVectorSystem系統(tǒng)中得到anti-ERK2基因腺病毒載體。 結果：DraⅠ和NotⅠ

2、雙酶切鑒定anti-ERK2基因腺病毒載體，發(fā)現(xiàn)插入的基因序列與插入方向均符合預期目標。 結論：成功構建了大鼠anti-ERK2腺病毒載體，為研究移植排斥中ERK2基因治療的作用提供了良好工具。 第二部分腺病毒攜帶的反義細胞外信號激酶-2基因治療對移植物血管和腎臟慢性排斥反應損傷的保護作用 目的：探討反義細胞外信號激酶-2基因治療對移植物血管和腎臟的慢性排斥反應損傷的保護作用及可能的機制。 方法：選用血管

3、移植(Brown-Norway→Lewis)和腎臟移植(Fisher344→Lewis)二種慢性排斥反應模型，移植前對同種血管移植物和腎臟移植物進行體外Adanti-ERK2基因轉染，分別于血管移植后60天和腎臟移植后90天分析慢性排斥反應發(fā)生時移植物的結構和功能變化、目的基因和蛋白的表達以及免疫系統(tǒng)的相應反應。 結果：Adanti-ERK2基因治療減少了移植物內ERK目的基因蛋白的表達，緩解了慢性排斥反應對同種血管移植物和腎臟

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