非酒精性脂肪性肝病的應用基礎研究.pdf

1、研究背景與目的： 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是指除外酒精和其他明確的損肝因素所致的，以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征，其疾病譜包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化及肝硬化等。隨著生活水平的提高和生活習慣的改變，NAFLD的患病率逐年升高，已成為一個全球性的公共衛(wèi)生問題。NAFLD的發(fā)生與肥胖、2型糖尿病、高血壓等代謝性疾病關系密切，但其

2、發(fā)病危險因素尚未完全闡明。B超和CT等影像學方法對診斷NAFLD有一定幫助，但不能有效地區(qū)分各種疾病階段；肝組織活檢仍然是當前診斷NAFLD的金標準，但由于肝組織活檢具有一定的創(chuàng)傷性，其臨床應用受到限制；因此臨床上迫切需要尋找一些高靈敏度和特異性的無創(chuàng)性NAFLD診斷方法。NAFLD以肝臟脂肪變性為主要特征，肝臟脂肪變性可對許多臨床實踐造成影響，其中肝臟缺血再灌注損傷是肝葉切除、肝外傷處理、肝移植過程中經常遇到的問題，缺血預處理在一定程

3、度上可減輕肝臟缺血再灌注損傷，但是不同程度肝臟脂肪變性是否對缺血預處理的保護作用造成影響目前尚不明確。本課題圍繞NAFLD發(fā)病危險因素分析、血清診斷標志物篩選、肝臟脂肪變性對缺血預處理保護作用的影響三部分內容開展研究。 研究方法： 在NAFLD發(fā)病危險因素分析方面，我們進行了一項樣本量為8925人的橫斷面研究；通過比較NAFLD人群與對照人群血清尿酸水平的差異，以及不同尿酸水平人群NAFLD患病率的差異，并作NAFLD危

4、險因素分析，以分析血清尿酸水平變化與NAFLD之間的可能聯(lián)系。在NAFLD血清診斷標志物篩選方面，我們收集了35份經肝臟組織學證實的NAFLD患者血清標本和35份正常對照血清標本，采用SELDI結合生物信息學分析，以篩選NAFLD血清診斷標志物。在肝臟脂肪變性對缺血預處理保護作用的影響方面，我們運用膽堿和蛋氨酸缺乏飲食建立了不同程度的小鼠肝臟脂肪變性模型，動態(tài)觀察缺血預處理對肝臟保護作用的變化，并進一步分析缺血預處理對肝臟ATP含量及A

5、TP5B蛋白表達的作用，為揭示肝臟脂肪變性對缺血預處理保護作用的影響機制提供線索。 結果： 橫斷面研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD人群的血清尿酸水平明顯高于對照人群(370.3±86.6vs.321.1±82.6μmol/L；P<0.001)；高尿酸血癥人群的NAFLD患病率明顯高于非高尿酸血癥人群(24.75％vs.9.54％；P<0.001)，且NAFLD患病率隨血清尿酸水平上升而增高(P<0.001)；多因素回歸分析顯示，高尿

6、酸血癥與NAFLD發(fā)病的危險因素有關(OR:1.291，95％CI:1.067-1.564；P<0.001)。 SELDI結果發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者組與正常對照組血清存在135個差異質荷比峰(上調59個/下調76個)；借助生物信息學軟件，我們建立了一個基于血清蛋白質指紋圖譜的NAFLD診斷模型，該模型敏感性和特異性分別為92.0％和88.0％；進一步的盲法驗證也顯示該診斷模型具有較高的靈敏度和特異性。 動物實驗結果提示，肝

7、臟缺血再灌注損傷程度隨肝臟脂肪變性程度的加重而加重，主要表現(xiàn)為血清ALT、AST水平的升高及肝臟病理學改變的加重；缺血預處理能顯著減輕正常肝臟和輕度脂變肝臟的缺血再灌注損傷，而對于中度和重度脂變肝臟，缺血預處理的保護作用消失；肝臟ATP含量及ATP5B表達變化趨勢與血清肝功能酶譜及肝臟病理學變化趨勢一致，提示不能有效改善肝臟能量代謝可能是缺血預處理保護作用消失的一個重要原因。 結論： 綜上，本研究得出以下結論：