巫山淫羊藿根化學(xué)成分和生物活性研究.pdf

1、巫山淫羊藿Ewushanense T.S.Ying主產(chǎn)于陜西、四川、貴州等地，是《中國(guó)藥典》2005年版收載的淫羊藿藥材的植物來(lái)源之一。目前在陜西省有明確記錄的為陜西安康市、平利縣和鎮(zhèn)平縣，且資源豐富，儲(chǔ)藏量大，具有研究開(kāi)發(fā)的資源優(yōu)勢(shì)。目前巫山淫羊藿的研究較少，且主要集中于地上部分，報(bào)道僅見(jiàn)其地上部分化學(xué)成分的分離及含量測(cè)定，而其根的系統(tǒng)研究少有報(bào)道，另一方面，巫山淫羊藿根在民間俗稱(chēng)“小黃連”，廣泛用于平喘、抗炎和抗菌。 本研究

2、內(nèi)容主要分三部分： 第一部分：巫山淫羊藿根中化學(xué)成分分離與分析 1．通過(guò)硅膠柱層析及葡聚糖凝膠純化，利用不同的洗脫體系對(duì)巫山淫羊藿根的化學(xué)成分進(jìn)行分離，得到十二種單體化合物，然后利用UV、IR、NMR、MS、COSY和NOE等技術(shù)鑒定了其中8種化合物的結(jié)構(gòu)，分別為雙藿苷A、淫羊藿屬苷A、朝藿定C、淫羊藿苷、淫羊藿屬苷C、意卡瑞苷A、去多甲基羥基淫羊藿素和齊墩果酸，除淫羊藿苷外，均為首次從該植物的根中分離得到，其它4種化合

3、物F2、F3、F4和F12正在鑒定中。 2．經(jīng)過(guò)鑒定和色譜圖的仔細(xì)比對(duì)，證明原來(lái)確定的柔藿苷結(jié)構(gòu)有誤，應(yīng)為朝藿定C。 3．研究了巫山淫羊藿中多種黃酮的含量測(cè)定方法，建立了梯度洗脫RP．HPI，C同時(shí)測(cè)定巫山淫羊藿中7種黃酮的含量測(cè)定方法。測(cè)定了不同部位、不同產(chǎn)地、不同葉齡的巫山淫羊藿中黃酮的含量；考察了十種不同品種淫羊藿中黃酮的含量；考察了生長(zhǎng)期巫山淫羊藿中朝藿定C和淫羊藿苷的動(dòng)態(tài)積累規(guī)律。 4．為2010年版中

4、國(guó)藥典一部巫山淫羊藿含量測(cè)定項(xiàng)的修訂工作進(jìn)行了基礎(chǔ)研究。研究表明，巫山淫羊藿葉中以朝藿定C含量為最高，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于現(xiàn)行檢測(cè)指標(biāo)淫羊藿苷的含量，不同部位主要成分的含量差異較大。生長(zhǎng)期任一月份巫山淫羊藿中朝藿定C的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于淫羊藿苷，兩者之間有一定的相關(guān)性，建議中國(guó)藥典2010年版將其單列對(duì)待。 第二部分：巫山淫羊藿應(yīng)用技術(shù)研究 通過(guò)比較研究幾種提取方法，獲得了以淫羊藿苷為指標(biāo)，含量>50％的總提取物。經(jīng)研究，以LSA-20大

5、孔樹(shù)脂純化巫山淫羊藿總提取物，所得產(chǎn)物純度高，工藝簡(jiǎn)單、提取效率高，適合工業(yè)化的大生產(chǎn)，其應(yīng)用技術(shù)已申報(bào)發(fā)明專(zhuān)利。 第三部分：巫山淫羊藿有效成分生物活性研究在完成巫山淫羊藿根中化學(xué)成分系統(tǒng)分離的基礎(chǔ)上，對(duì)巫山淫羊藿有效成分的生物活性進(jìn)行了探索。 1．研究了巫山淫羊藿提取液及巫山淫羊藿根中7種8-異戊烯基黃酮類(lèi)單體成分體外抗氧化作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，巫山淫羊藿提取液及巫山淫羊藿根中的8-異戊烯基黃酮類(lèi)單體成分對(duì)DPPH自由基

6、具有很強(qiáng)的清除作用，表明這7種黃酮類(lèi)化合物及巫山淫羊藿提取液具有明顯的抗氧化作用，其中去多甲基羥基淫羊藿素和淫羊藿屬苷C具有較強(qiáng)的抗氧化活性，其抗氧化活性幾乎可與維生素C相媲美，明顯強(qiáng)于其他五種黃酮類(lèi)化合物。 2．研究了巫山淫羊藿主要成分的抗菌作用，實(shí)驗(yàn)表明，以銅綠甲單孢細(xì)菌為目標(biāo)菌，在固體培養(yǎng)基中雙藿苷A、意卡瑞苷A和去多甲基羥基淫羊藿素對(duì)銅綠甲單孢細(xì)菌具有顯著的抗菌活性。 值得注意的是：在液體培養(yǎng)體系中雙藿苷A對(duì)銅綠