FK506處理的供者樹突狀細胞在誘導大鼠同種移植免疫耐受中的作用.pdf

1、目的：研究FK506處理的供者未成熟樹突狀細胞(immature dendritic cell，imDC)對大鼠同種異體器官移植免疫耐受的影響，探討imDC誘導免疫耐受的機制。 方法：聯(lián)合應用低劑量重組大鼠GM-CSF(1.5ng/ml)和IL-4(4 ng/ml)誘導Wistar大鼠骨髓細胞，培養(yǎng)出大量未成熟樹突狀細胞(imDC)，并分別用LPS和FK506加以處理，利用形態(tài)學及FCM鑒定其成熟度。將SD大鼠分為3組：第1組為

2、對照組，術前7天尾靜脈注射生理鹽水1.0ml；第2組為未經FK506處理組，術前7天尾靜脈注射未經FK506處理的imDC 2×10<'6>(1.0ml)；第3組為FK506處理組，術前7天注射FK506處理的imDC 2×10<'6>(1.0m].)。以Wistar大鼠為供體，SD大鼠為受體，行頸部心臟移植，觀察移植心臟存活時間、移植后大鼠與Wistar大鼠及第三品系Lewis大鼠單向MLR、心肌病理及血清IL-2、IL-4、IL-1

3、0、IFN-r的水平變化。 結果：1、流式細胞儀分析結果顯示所培養(yǎng)的細胞表面低表達CD80、CD86，LPS的刺激使這些分子表達明顯上調，因此確定所培養(yǎng)的細胞是imDC。FK506能夠抑制DC表面CD80和CD86分子的上調。 2、45例大鼠頸部心臟移植模型，手術成功率80.0％。H檢驗顯示，3組移植心臟存活時間的差異有高度統(tǒng)計學意義(P<0.01)；q檢驗顯示，3組間兩兩比較，1、2組，1、3組間差異有高度統(tǒng)計學意義(

4、P<0.01)，2、3組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 3、供體大鼠脾細胞作為刺激細胞時，未經FK506處理組大鼠MLR的SI值(3.48±0.84)，F(xiàn)K506處理組SI值(3.59±0.68)，均明顯低于對照組(6.83±0.47)，差異有高度統(tǒng)計學意義(P<0.01)，2、3組間SI值無明顯差異。第三品系Lewis大鼠脾細胞作為刺激細胞時，未經FK506處理組SI值(6.57±0.51)，F(xiàn)K506處理組SI值(6.

5、67±0.66)，與對照組(6.58±1.03)之間無明顯差異(P>0.05)。 4、方差分析示各組大鼠血清IL-2、IFN-r、IL-4、IL-10濃度間差異有高度統(tǒng)計學意義(P<0.01)。S-N-K檢驗顯示，2、3組IL-2水平于第7天時無明顯差異，IFN-r水平于第14天時無明顯差異(P>0.05)；其余各組間差異均有高度統(tǒng)計學意義(P(0.01)。第2、3組代表Th1的IL-2、IFN-r的水平明顯降低，而代表Th2的

6、IL-4、IL-10水平明顯增高。 5、對照組的移植心臟病理顯示心肌明顯充血、水腫，大量炎性細胞浸潤，心肌細胞明顯變性壞死；未經FK506處理組的心肌淋巴細胞浸潤明顯減少，心肌細胞無明顯變性、壞死；FKS06處理組幾乎見不到炎性細胞浸潤以及心肌細胞變性和壞死。 結論：1、FKS06對DC的功能成熟有明顯的抑制作用。 2、imDC能夠誘導同種異體大鼠心臟移植免疫耐受；FK506處理的imDC能夠加強這種免疫耐受。