藥物誘導大鼠隱睪模型比較及T3干預Flutamide誘導隱睪NCAM表達研究.pdf

1、目的:
　　 比較鄰苯二酸二丁酯(DBP)、己烯雌酚(DES)、氟他胺(Flu)宮內(nèi)誘導SD鼠隱睪模型的組織病理變化,選擇與臨床隱睪病理改變接近的模型。觀察T3調控SD鼠隱睪生殖母細胞(Gonocyte,Go)發(fā)育及NCAM表達。
　　 方法:
　　 ①SD孕鼠,于受孕(gestational day GD)12-21d給予DES、Flu皮下注射,DBP灌胃,建立大鼠隱睪模型；收集50個臨床隱睪活檢組織。

2、　　 ②免疫組化定性、定位檢測睪丸NCAM的表達。
　　 ③T315μg·kg-1·d-1皮下注射Flu誘導PD1仔鼠,PD20隱睪鼠,觀察干預后隱睪發(fā)生率、組織學改變,以及NCAM在的表達。
　　 結果:
　　 ①Flu誘導大鼠隱睪發(fā)生率為42.2％,睪丸位于腹股溝,尿道下裂發(fā)生率93.3％。睪丸體積、臟器系數(shù)明顯小于正常對照組(P<0.01)。Flu隱睪管腔化延遲；PD20、PD80隱睪管腔中央仍可見未遷移

3、的Go,PD80曲細精管中無精子生成；平均曲細精管直徑(MSTD)和面積(MSTA)與正常相比有顯著性差異(P＜0.01)。
　　 ②DBP誘導大鼠隱睪發(fā)生率為為42.5％,隱睪位于腹腔,尿道下國家自然科學基金:30772274重慶市自然科學基金:CSTC,2007BB5285裂發(fā)生率25.0％。睪丸體積、臟器系數(shù)明顯小于正常(P＜0.01),曲細精管中無精子生成,生精細胞稀少,部分管腔僅有支持細胞。
　　 ③DES高劑

4、量可致SD孕鼠流產(chǎn)或死亡,低劑量1.5μg·kg-1·d-1不能誘導出隱睪模型。仔鼠發(fā)育與正常接近,成年后均具有生殖能力。睪丸體積、臟器系數(shù)、MSTD、MSTA與正常組無顯著性差異(P＞0.05),管腔中央可見大量的精子生成。
　　 ④50個臨床隱睪中,NCAM表達分布模式有4種:(1)曲細精管內(nèi)陰性表達、間質細胞陽性表達42％,為生理發(fā)育規(guī)律表達；(2)曲細精管內(nèi)陽性表達、間質細胞陽性表達26％；(3)曲細精管內(nèi)陽性表達、間質

5、細胞陰性表達4％；(4)曲細精管內(nèi)陰性表達、間質細胞陰性表達28％。
　　 ⑤DES、DBP大鼠曲細精管NCAM表達與正常組一致,PD1管腔內(nèi)Go均有陽性表達,PD10管腔內(nèi)Go遷移至基底膜,NCAM表達明顯減弱至消失。PD20、PD80隱睪及下降睪丸曲細精管內(nèi)NCAM陰性表達。Flu誘導PD10、PD20、PD80隱睪管腔NCAM陽性表達。
　　 ⑥T315μg·kg-1·d-1干預:Flu誘導PD1仔鼠,成年后隱睪發(fā)

6、生率為25％(4/16),較未干預組的隱睪發(fā)生率42.9％(12/28)降低,并可促進曲細精管管腔化,隱睪曲細精管內(nèi)NCAM陰性表達。
　　 ⑦Flu誘導的PD13仔鼠睪丸NCAM的mRNA表達均明顯高于正常對照組(P＜0.05),T3干預后,NCAM的mRNA表達明顯低于非T3干預組(P<0.05),并與正常對照組無明顯差異(P＞0.05)。
　　 結論:
　　 ①孕期宮內(nèi)誘導隱睪模型中,Flu誘導的隱睪組織中