放療后復發(fā)鼻咽癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定和雜合性缺失研究及eIF4E的表達.pdf

1、[目的]
　　 在染色體常見的斷裂點、缺失區(qū)域?qū)ふ遗c腫瘤發(fā)生發(fā)展相關的侯選基因成為了腫瘤研究熱點。微衛(wèi)星作為一種優(yōu)越的遺傳標記,其分析技術是定位腫瘤相關基因可行穩(wěn)定的研究方法。目前已發(fā)現(xiàn)原發(fā)鼻咽癌在染色體1p、3p、3q、4q、9q、11q、13q、14q等染色體臂多個位點發(fā)生高頻率LOH,本實驗分別選取以上染色體臂的12個微衛(wèi)星位點,檢測比較放療后復發(fā)鼻咽癌與初診鼻咽癌中的這12個位點微衛(wèi)星不穩(wěn)定和雜合性缺失的發(fā)生情況,為定位

2、鼻咽癌復發(fā)相關基因提供分子遺傳學依據(jù),以及這種分子生物學變化是否可以成為預測鼻咽癌放療預后的方法,為基因治療提供新靶點;研究eIF4E在初診鼻咽癌和放療后復發(fā)鼻咽癌中的表達,探討eIF4E表達對鼻咽癌放療后復發(fā)的影響。
　　 [方法]
　　 1、選擇12個微衛(wèi)星多態(tài)性位點,顯微切割分離提取22例初診鼻咽癌組織和18例放療后復發(fā)鼻咽癌組織的石蠟切片中的正常組織和腫瘤組織DNA,經(jīng)PCR擴增及聚丙烯酰胺凝膠電泳和硝酸銀染色,

3、進行MSI及LOH分析研究。
　　 2、采用免疫組化SP法檢測22例初診鼻咽癌組織和20例放療后復發(fā)鼻咽癌組織中eIF4E的表達。
　　 [結果]
　　 1、共有8個位點發(fā)生了雜合性缺失。D1S2697、D9S1682、D14S258、D13S133等4個位點在放療后復發(fā)鼻咽癌與初診鼻咽癌中均出現(xiàn)雜合性缺失,其中位點D1$2697在放療后復發(fā)鼻咽癌中的雜合性缺失率(28.6％,2/7)比在初診鼻咽癌中的雜合性缺失

4、率(20.0%,1/5)高8.6%,位點D13S133在放療后復發(fā)鼻咽癌中的雜合性缺失率(30%,3/10)比在初診鼻咽癌中的雜合性缺失率(20.0%,2/10)高10.0%。位點D5S433只在放療后復發(fā)鼻咽癌中發(fā)生了雜合性缺失,雜合性缺失率(33.3%,1/3)。
　　 2、11個位點發(fā)生了微衛(wèi)星不穩(wěn)定。D3S2338、D13S263、D14S65、D13S133等4個位點在放療后復發(fā)鼻咽癌與初診鼻咽癌中均出現(xiàn)微衛(wèi)星不穩(wěn)定,

5、其中位點D13S263在放療后復發(fā)鼻咽癌中的微衛(wèi)星不穩(wěn)定發(fā)生率(38.5%,5/13)比在初診鼻咽癌中的微衛(wèi)星不穩(wěn)定發(fā)生率(30.0%,3/10)高8.5%。
　　 3、18例放療后復發(fā)鼻咽癌中有10例病例發(fā)生了兩個或兩個以上的微衛(wèi)星位點改變(包括雜合性缺失和/或微衛(wèi)星不穩(wěn)定),占放療后復發(fā)鼻咽癌的55.6%,22例初診鼻咽癌中有7例病例發(fā)生了兩個或兩個以上的微衛(wèi)星位點改變(包括雜合性缺失和/或微衛(wèi)星不穩(wěn)定),占初診鼻咽癌的31

6、.8%。
　　 4、eIF4E在放療后復發(fā)鼻咽癌與初診鼻咽癌中的陽性率分別為100%(20/20)和81.2%(18/22),兩組鼻咽癌eIF4E表達強度經(jīng)秩和檢驗,p＜0.05,差異有統(tǒng)計學意義。eIF4E在放療后復發(fā)鼻咽癌與初診鼻咽癌中的強陽性(+++)表達率分別為45%(9/20)和13.6%(3/22),兩者經(jīng)四格表卡方檢驗,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 [結論]
　　 1、位點D1S2697

7、、D13S133、D5S433可能含有與放療后復發(fā)鼻咽癌相關的腫瘤抑制基因。
　　 2、位點D13S263、D14S70、D3S1300、D1S2697、D11S4946在放療后復發(fā)鼻咽癌中微衛(wèi)星不穩(wěn)定發(fā)生率呈增高趨勢。
　　 3、位點D3S2338、D13s133、D4S350、D13S263的遺傳不穩(wěn)定性提示可能存在與NPC發(fā)生發(fā)展有關的基因。
　　 4、eIF4E的高表達與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展有關,可能與鼻咽癌放