重慶市霍亂弧菌的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、本課題以霍亂弧菌特異性的霍亂腸毒素A亞單位基因(ctxA)、毒素協(xié)同調(diào)節(jié)菌毛A基因(tcpA)和全DNA序列為目標(biāo)，通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)、限制性?xún)?nèi)切酶技術(shù)、脈沖場(chǎng)凝膠電泳技術(shù)和BioNumericsV4.0軟件UPGMA方法進(jìn)行聚類(lèi)分析，觀察了來(lái)源于重慶市1992年至2006年的疫情和環(huán)境檢測(cè)樣本的94株霍亂弧菌核酸分子特征。 著重探索霍亂暴發(fā)疫情分離的菌株與菌株之間，疫情分離的菌株與海、水產(chǎn)品監(jiān)測(cè)分離的霍亂弧菌之間的

2、遺傳相關(guān)性，推斷疫情菌株的來(lái)源、變遷及分子指紋圖譜變化規(guī)律，以期為預(yù)測(cè)疫情和制定防治措施提供依據(jù)。 研究結(jié)果顯示： 1、94株霍亂弧菌樣本(83株感染者樣本，11株環(huán)境樣本)中ctxA基因陽(yáng)性檢出92株(97.87％)，2株水產(chǎn)品市場(chǎng)監(jiān)測(cè)分離菌株為陰性；tcpA基因陽(yáng)性檢出91株(96.81％)，2株水產(chǎn)品市場(chǎng)監(jiān)測(cè)分離菌株和1株來(lái)源于病人的分離株為陰性。 2、94株霍亂弧菌被分為44種脈沖場(chǎng)凝膠電泳圖譜，聚類(lèi)分析

3、將大部分菌株分為三類(lèi)(小川型，稻葉型，0139群)。 3、2002年重慶市部分區(qū)縣多點(diǎn)暴發(fā)霍亂疫情埃爾托稻葉型1d霍亂弧菌菌株基因同源性較高；1992-2006年重慶市埃爾托小川型和埃爾托稻葉型相似系數(shù)僅為75％；從甲魚(yú)分離的0139群霍亂弧菌與同期流行的0139群霍亂弧菌優(yōu)勢(shì)菌株的脈沖場(chǎng)凝膠電泳圖譜型別一致，并且也為產(chǎn)毒株。 由此可見(jiàn)，1992-2006年重慶市霍亂弧菌流行株存在緊密相關(guān)的核酸分子特征；經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的霍亂流