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文檔簡介
1、目的:白內障是一種多因素疾病,除了遺傳因素這外,其發(fā)病和發(fā)展還與年齡、性別、放射(可見光,紫外線,X線等)、氧化、物理損傷、飲食和用藥等因素有關,這些因素可以導致基因表達的異常而影響晶狀體的透明度,最終形成白內障.該研究應用mRNA差異顯示法比較不同類型白內障患者晶狀體上皮細胞基因表達與正常人的差異,尋找白內障的致病基因和抗病基因,以探討白內障發(fā)病的分子機制.而警備高質量的人類晶狀體上皮細胞總協(xié)調性和非協(xié)調性異種移植實驗RNA是完成差異
2、顯示法的前提條件.組織標本少,細胞RNA含量低,決定必須建立一套提取小于50mg的少量眼部組織(尤其是晶狀體前囊膜)總RNA的方法,并將該方法應用到后面的差異顯示實驗中.結論:1、提取少量組織和細胞總RNA時Trizol中添加糖原至終濃度為0.1μg/μl,可以明顯提高產量,不影響RNA的完整性和逆轉錄酶及Taq酶的活性,可以應用于該研究第二部分差異顯示和驗證步驟中晶狀體囊膜總RNA的提取.2、該研究發(fā)現26個各類型白內障與正常人晶狀體
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