人睪丸特異的磷酸吡哆醛激酶變異剪接體PKH-T表達研究.pdf

1、目的:在睪丸基因芯片與成人、胚胎睪丸及精子探針雜交發(fā)現(xiàn)PKH-T基因的基礎上,研究其表達.方法:對目的克隆進行測序,得到其全長序列.利用生物信息學的方法分析測序結果.通過RT-PCR的方法檢測出其在不同人體組織、不同生理時期男性睪丸、不同臨床病理診斷的男性不育患者睪丸組織中表達的差異.結果:通過如上實驗克隆一種新的人類睪丸特異全長基因PKH-T.PKH-T的cDNA全長1069bp.此cDNA序列被輸入到Genbank,登錄號為AY30

2、3972.蛋白質結構分析顯示PKH-T包含幾乎所有PKH基因的保守基序.同源比對顯示由PKH-T的開放閱讀框架(ORF)推導出的239個氨基酸與人類基因PKH(U89606)表達的蛋白質同源.實驗結果顯示PKH-T高度特異地在睪丸組織表達,并且信號強度較高.對PKH和PKH-T在不同發(fā)育階段的男性睪丸中不同表達進行研究發(fā)現(xiàn),PKH-T在成人睪丸和精子中有表達,而PKH在成人睪丸、胚胎睪丸、老年人的睪丸中有表達.用RT-PCR的方法研究發(fā)