miR-10b、RHOC及相關基因在肝細胞癌中與轉移浸潤相關的病理學研究.pdf

1、目的:分析肝細胞癌中miR-10b、RHOC及相關基因的表達，探討這些基因參與肝細胞癌惡性生物學行為，及miR-10b可能參與調控RHOC轉移浸潤的機制。
　　 材料和方法:選取2000年1月至2005年12月在我院行手術切除的肝細胞癌病例，共375例，獲得隨訪信息185例。分析本組病例臨床病理特征及與預后的關系。留取2007～2008年間手術切除的新鮮肝細胞癌及癌旁肝組織標本19例，Western blot檢測RHOC蛋白的表

2、達，免疫組化檢測cyclin D1、P21WAF1的表達，分析其相關性及與臨床病理特征的關系；選取有隨訪資料的病例80例，免疫組化檢測cyclin D1、P21WAF1、p53、ki-67及GPC3在肝細胞癌中的表達，分析各基因表達與臨床病理特征的關系及各基因表達之間的相關性；Kaplan-Meier生存分析分析各基因表達的預后意義；COX風險模型分析各臨床病理特征及基因表達的預后意義。提取新鮮肝細胞癌及癌旁肝組織中的RNA，實時定量P

3、CR法檢測miR-10b和RHOC mRNA基因的表達，分析二者相關性及與臨床病理特征的關系。
　　 結果:
　　 1.本組資料顯示肝細胞癌發(fā)病年齡19～72歲，平均50.57±10.46歲，發(fā)病高峰年齡40～60歲，男女比例為10.7：1；HBsAg(+)87.4％，anti—HCV抗體(+)4.3％；術后3年生存率為52％，5年生存率為38％；腫瘤數(shù)目(p=0.000)、腫瘤大小(p=0.025)、組織學結構類型(p

4、=0.000)、核分級(p=0.000)、分化程度(p=0.001)及血管浸潤均(p=0.000)與預后明顯相關；其中組織學結構類型中細梁狀型生存時間與致密梁狀型和腺樣型無明顯區(qū)別(p>0.05)而明顯高于粗梁狀型、實性型和硬化型(p≤0.009)，硬化型生存時間與實性型之間無明顯區(qū)(p>0.05)而明顯低于其余各型(p≤0.006)；核分級1級與2級生存時間無明顯區(qū)別(p>0.05)，核分級3級與4級生存時間無明顯區(qū)別(p>0.05)

5、，而核分級3級生存時間明顯低于2(p=0.000)：小細胞型、巨細胞型和梭形細胞型主要由實性型和粗梁狀型組織學結構類型構成，明顯不同于透明細胞型(主要由細梁狀型和粗梁狀型構成)(p≤0.006)。
　　 2.Western blot顯示9/19例肝細胞癌中RHOC蛋白高表達，與血管浸潤明顯相關(p=0.020)。RHOC陽性表達與cyclin D1陽性表達明顯正相關(P=0.010)；cyclin D1陽性表達與高核分級明顯相關

6、(p=0.041)；p21WAF1及p53陽性表達均與分化程度(分別為p=0.032，p=0.031)和血管浸潤(p=0.036，p=0.011)正相關；ki67陽性表達與分化程度(p=0.004)、核分級(p=0.045)和血管浸潤(p=0.001)正相關；GPC3表達與腫瘤數(shù)目(p=0.038)和分化程度(p=0.013)正相關。生存分析顯示cyclin D1及ki67有明顯預后意義。ki67陽性表達與p53(p=0.000)及p2

7、1WAF1(p=0.047)陽性表達有明顯相關性，其他各基因之間表達無明顯關系。
　　 3.COX回歸模型分析顯示腫瘤大小(p=0.042)、腫瘤數(shù)目(p=0.004)及血管浸潤(p=.000)為獨立預后因素。
　　 4.與癌旁肝組織相比，miR-10b在肝細胞癌中的平均表達增高(p=0.049)，但miR-10b低表達組血管浸潤明顯高于高表達組(P=0.020)；與癌旁肝組織相比，RHOC mRNA在癌組織中的表達增高

8、(P=0.032)，同時RHOCmRNA高表達組血管浸潤明顯高于低表達組(P=0.041)。miR-10b和RHOc mRNA的表達未發(fā)現(xiàn)有明顯相關性。
　　 結論
　　 1.除腫瘤大小、腫瘤數(shù)量、分化程度、血管浸潤以外，肝細胞癌組織學結構類型和核分級均有明顯預后意義。
　　 2.miR-10b、RHOC、cyclin D1、ki67及GPC3均參了與肝細胞癌的生物學進程；RHOC可能參與了細胞周期調控。cycl