膿毒血癥血管內(nèi)皮功能的細(xì)胞標(biāo)記物研究.pdf

1、目的：檢測(cè)成人外周血循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（CECs）計(jì)數(shù)的正常值，為開(kāi)展相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)；通過(guò)臨床研究觀察和分析膿毒血癥時(shí)CECs及內(nèi)皮細(xì)胞微粒（EMPs）數(shù)量的變化及其意義，初步探討其變化可能的機(jī)制。 方法：排除已知影響因素，以CD45-/CD146+為表型標(biāo)志，采用流式細(xì)胞學(xué)方法（FCM）檢測(cè)健康成人CECs數(shù)量，統(tǒng)計(jì)并確立正常值范圍；對(duì)排除已知影響因素的31例入選膿毒血癥患者（2007年10月至2008年5月，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附

2、屬瑞金醫(yī)院SICU），于不同時(shí)間點(diǎn)（膿毒血癥診斷明確第1、2、3、7、14天）采用FCM檢測(cè)CECs及EMPs數(shù)量，其中CECs以CD45-/CD146+為表型，EMPs以CD31+/Annexin－V＋為表型。同時(shí)用血漿與體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞株共孵育48小時(shí)，采用FCM檢測(cè)其凋亡比例，并用ELISA法檢測(cè)血漿TNF-α、IL-1β、IL-4和IL一10水平。并按診斷當(dāng)天APACHEII評(píng)分分為輕度組（<9分）、中度組（9～15分）和重度

3、組（>15分），各組按病情轉(zhuǎn)歸分為存活組及死亡組。 結(jié)果：健康成人CECs計(jì)數(shù)的正常參考范圍是0.6～36.9個(gè)/105PBMCs，不同年齡及性別組其數(shù)量沒(méi)有顯著差異；膿毒血癥患者隨著病情的加重，EMPs、TNF-α及IL-1β均顯著增高（P<0.05），中度組CECs及IL-10較輕度組增高，但重度組CECs顯著低于輕、中度組（P<0.05），重度組IL－4及IL-10低于中度組；死亡及存活組EMPs隨病情程度加重而升高，死亡

4、患者血中EMPs及促炎因子顯著高于同病情組存活者（P<0.05），而CECs及抑炎因子顯著低于同病情組存活者（P<0.05）；膿毒血癥患者血漿與內(nèi)皮細(xì)胞株共孵育時(shí)，血漿中微生物造成嚴(yán)重污染，內(nèi)皮細(xì)胞均凋亡，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡率無(wú)意義。 結(jié)論：①以CD45-/CD146+為表型標(biāo)記，采用FCM檢測(cè)方法，健康成年人CECs數(shù)量的正常范圍是0.6～36.9個(gè)/105PBMCs。②膿毒血癥患者內(nèi)皮功能受損，CECs及EMPs水平可作為反