DNA拓撲異構酶Ⅱ抑制劑以依賴LXR的方式誘導巨噬細胞ABCA1表達及膽固醇外輸.pdf

1、動脈粥樣硬化斑塊的形成是心血管疾病的主要病理之一。富集大量膽固醇和脂質的巨噬細胞（亦稱為泡沫細胞）是動脈粥樣硬化斑塊的重要組成成分。因此，維持巨噬細胞內膽固醇的動態(tài)平衡對于阻止動脈粥樣硬化斑塊及心血管疾病的發(fā)生發(fā)展至關重要。膽固醇逆轉運是體內膽固醇代謝的重要過程，能有效地防止冠心病的發(fā)生。
　　ATP結合盒轉運蛋白A1（ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1）對心血管系統(tǒng)的保護作用已在人

2、類和動物模型中得到驗證。ABCA1利用ATP水解能量，主動、單向地將自由膽固醇和磷脂從巨噬細胞內運輸到細胞外膽固醇接收提，是膽固醇外流與逆向轉運過程的關鍵第一步，對初生態(tài)HDL的形成及其代謝過程中起著至關重要的作用。細胞中ABCA1的水平主要通過轉錄來調節(jié)，特別是通過配體激活的肝X受體，LXR（一種重要的轉錄因子）。
　　Teniposide和etoposide是目前已上市的兩種DNA拓撲異構酶Ⅱ的抑制劑。兩者的作用機制類似，均促

3、使酶-DNA斷裂復合物的形成，使平衡反應趨向于酶-DNA斷裂復合物，延長其半衰期并使其穩(wěn)定?？蓴嗔褟秃衔锏男纬杉胺€(wěn)定存在促進了DNA的異常重組，從而啟動細胞凋亡程序而導致細胞死亡，因此，此類抑制劑臨床上可應用與腫瘤腫瘤。DNA拓撲異構酶Ⅱ與其抑制劑在腫瘤學和免疫學得到深入的研究，但是否在其他領域發(fā)揮功能尚不清晰。有報道發(fā)現etoposide可以顯著減緩兔中動脈硬化進程，但其機理不明，我們認為DNA拓撲異構酶Ⅱ的抑制劑可通過調節(jié)巨噬細胞膽

4、固醇外流及相關分子的表達，從而抑制巨噬細胞泡沫化并發(fā)揮抗動脈粥樣硬化功能。在此文中，我們通過實驗證實DNA拓撲異構酶Ⅱ抑制劑teniposide和etoposide可以有效地誘導巨噬細胞自由膽固醇外流，這種誘導作用與巨噬細胞ABCA1 mRNA和蛋白上調相一致。teniposide和etoposide可以誘導ABCA1啟動子活性，這種誘導作用與ABCA1啟動子上的LXRE密切相關，是以依賴LXR的方式上調ABCA1啟動子活性。同時EMS

5、A實驗結果證實，teniposide和etoposide有效增強了LXRE-LXR/RXR復合體的形成。啟動子實驗及EMSA實驗結果證明teniposide和etoposide在轉錄水平上以LXR依賴的方式誘導ABCA1表達。同時，我們也證實了teniposide和etoposide可以誘導其它LXR靶基因ABCG1和FASN的表達。體內實驗證明teniposide和etoposide可以有效地誘導體內膽固醇由巨噬細胞向體外的逆轉運。<

6、br>　　在本文中，我們還發(fā)現另外一類抗腫瘤藥物MEK1/2抑制劑PD98059和U0126亦可以很好地誘導體外和體內巨噬細胞ABCG1的表達和體內膽固醇外流。U0126亦可以很好地誘導動脈粥樣硬化斑塊處巨噬細胞中ABCG1的表達。
　　綜上所述，我們的研究結果證實teniposide和etoposide及其他抗腫瘤藥物可以誘導巨噬細胞膽固醇外流分子的表達及膽固醇外輸，抑制巨噬細胞內膽固醇的積累，細胞泡沫化與動脈粥樣硬化的發(fā)展。我