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文檔簡介
1、本文分三個部分進行探討。
第一部分:DMRT1在SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)
目的:檢測DMRT1在SD大鼠各種組織中的表達(dá),明確其在SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。
方法:通過PCR檢測DMRT1在SD大鼠肝、脾、腎、睪丸和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)情況;運用免疫熒光技術(shù)檢測DMRT1在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。
結(jié)果:DMRT1表達(dá)于SD大鼠睪丸和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中。
結(jié)論:DM
2、RT1不僅表達(dá)于大鼠睪丸組織中,而且還在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)。
第二部分:DMRT1在SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)調(diào)控
目的:檢測卵泡刺激素和佛波酯分別處理后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中DMRT1的表達(dá)情況。
方法:用卵泡刺激素和佛波酯分別作用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,采用RT-PCR來檢測處理之后的DMRT1表達(dá)情況。
結(jié)果:用卵泡刺激素處理后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中DMRT1的表達(dá)明顯高于處理前的對照
3、組(P<0.05);用佛波酯處理后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中DMRT1的表達(dá)明顯低于處理前的對照組(P<0.05)。
結(jié)論:卵泡刺激素和佛波酯對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中DMRT1的表達(dá)有調(diào)控作用。卵泡刺激素促進DMRT1的表達(dá),而佛波酯使DMRT1的表達(dá)降低。
第三部分:DMRT1表達(dá)調(diào)控在SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化中的作用
目的:研究SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rBMSCs)誘導(dǎo)分化過程中DMRT1與視黃酸和St
4、ra8的關(guān)系。
方法:選取rBMSCs第三代細(xì)胞(P3),將實驗分為對照組、全反式視黃酸誘導(dǎo)組、全反式視黃酸和卵泡刺激素處理組以及全反式視黃酸和佛波酯處理組,誘導(dǎo)細(xì)胞至7天和21天,用RT-PCR檢測DMRT1和Stra8的表達(dá),分析其mRNA的表達(dá)量的變化,從而尋求兩者之間的關(guān)系。
結(jié)果:在第7天和21天,全反式視黃酸和卵泡刺激素處理組中DMRT1的表達(dá)明顯
高于全反式視黃酸誘導(dǎo)組(P<0.05);全反式
5、視黃酸和佛波酯處理組中DMRT1的表達(dá)明顯低于全反式視黃酸誘導(dǎo)組(P<0.05)。對照組以及全反式視黃酸和卵泡刺激素處理組中Stra8沒有表達(dá);全反式視黃酸和佛波酯處理組中Stra8的表達(dá)明顯高于全反式視黃酸誘導(dǎo)組(P<0.05)。
結(jié)論:DMRT1的表達(dá)量變化引起Stra8的表達(dá)量變化,DMRT1高表達(dá)時,Stra8表達(dá)量降低或不表達(dá);DMRT1低表達(dá)時,Stra8表達(dá)量增高。這一結(jié)果表明在ATRA誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化過
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