G-CSFRI型異構體在髓系白血病細胞中的表達及其臨床意義.pdf

1、目的:研究G-CSFR I型異構體在髓系白血病細胞中的表達及其臨床意義。
　　方法:
　　1.收集89例急性髓系白血病(非急性早幼粒細胞白血病)[AML(non-APL)]患者緩解前及21例緩解后骨髓標本,以9例正常人骨髓標本作為對照,Ficoll分離液梯度分離骨髓單個核細胞。
　　2.收集13例初診AML(non-APL)患者外周血標本,以10例正常人骨髓標本作為對照,Ficoll分離液梯度分離單個核細胞,流式細胞分

2、選儀分選CD34+細胞。
　　3.實時定量PCR(QRT-PCR)檢測上述各組細胞G-CSFRI型異構體mRNA的表達水平,比較其與FAB分型、外周血白細胞數(shù)及幼稚細胞比例的關系。
　　4.以HL-60及U937細胞為研究對象,QRT-PCR檢測ATRA處理后HL-60及U937細胞G-CSFRI型異構體的表達變化。
　　5.MTT法及流式細胞術檢測G-CSF對ATRA誘導的G-CSFRI型異構體上調的HL-60、U9

3、37細胞增殖、分化的影響。
　　結果:
　　1.AML緩解前骨髓單個核細胞G-CSFRI型異構體表達水平低于緩解后及正常對照兩組(P<0.05);其中12例自身對照的AML患者有11例緩解前G-CSFRI型異構體的表達水平低于緩解后(P<0.05)。13例分選的AMLCD34+細胞G-CSFRI型異構體表達水平也低于正常對照CD34+細胞及未分選的AML細胞(P<0.05)。
　　2.AML患者G-CSFRI型異構體的

4、表達水平與外周血白細胞數(shù)(r=-0.290,p<0.01)和幼稚細胞比例(r=-0.362,p<0.01)呈負相關,即G-CSFRI型異構體表達水平低的AML患者,其外周血白細胞數(shù)及幼稚細胞比例越高。此外,不同F(xiàn)AB分型的AML患者G-CSFRI異構體表達水平無明顯差異。
　　3.ATRA能顯著上調HL-60及U937細胞G-CSFRI型異構體的表達,同時抑制細胞增殖及誘導細胞分化(P<0.01)。
　　4.G-CSF能促進

5、HL-60及U937細胞增殖(P<0.05),而不能誘導HL-60及U937細胞分化。ATRA能抑制G-CSF對HL-60及U937細胞的促增殖作用(P<0.01),G-CSF與ATRA聯(lián)合能促進ATRA對HL-60及U937細胞的促分化作用(P<0.05)。ATRA處理細胞24h后加用G-CSF對HL-60及U937細胞的促分化作用較兩藥同時用明顯,但差別無統(tǒng)計學意義。
　　結論:
　　1.G-CSFRI型異構體在AML患