大鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰中甲羥戊酸途徑相關(guān)酶的研究.pdf

1、第一部分大鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰模型的建立
　　研究背景:
　　射血分?jǐn)?shù)正常心衰(HFpEF)是左室收縮功能正常而舒張功能障礙的一個(gè)臨床綜合癥，其占心衰總?cè)藬?shù)40％左右。HFpEF發(fā)病率和死亡率逐年增高，且無(wú)有效的治療措施，其預(yù)后極差。HFpEF主要危險(xiǎn)因素包括:高血壓、糖尿病、肥胖和年齡。左室舒張功能障礙尤其多見(jiàn)于高血壓病人，一半以上的高血壓病人有左室舒張功能障礙。到目前為止，HFpEF具體發(fā)病機(jī)制尚

2、不完全清楚，對(duì)其進(jìn)一步研究將有助于改善其預(yù)后。
　　目的:
　　通過(guò)對(duì)大鼠腹主動(dòng)脈縮窄建立壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的左室肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰模型。
　　方法:
　　(1)腹主動(dòng)脈縮窄建立壓力超負(fù)荷模型（AAC）及假手術(shù)模型（sham）。
　　(2)術(shù)后3、5、8和14周心臟超聲及頸動(dòng)脈插管測(cè)心功能和血流動(dòng)力學(xué)。
　　(3)酶免疫試驗(yàn)(EIA)檢測(cè)血漿BNP水平。
　　(4)HE及Masson染色等組織學(xué)

3、分析法檢測(cè)左室及腹主動(dòng)脈肥厚。
　　結(jié)果:
　　(1)術(shù)后3、5、8和14周，AAC組血壓較sham組明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(2)術(shù)后3、5、8和14周，AAC組左室及縮窄近端腹主動(dòng)脈組織肥厚明顯，較sham組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(3)術(shù)后3、5、8和14周，AAC組血漿BNP較sham組明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　(4)術(shù)后3和5周，主要表現(xiàn)為左室肥厚，隨著縮窄時(shí)間延長(zhǎng)，術(shù)后8和14周，AAC

4、組出現(xiàn)左室舒張功能障礙，而收縮功能未發(fā)生明顯改變。
　　結(jié)論:
　　大鼠腹主動(dòng)脈縮窄后血壓明顯升高，誘導(dǎo)出左室和縮窄近端腹主動(dòng)脈肥厚。同時(shí)，隨著縮窄時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠出現(xiàn)左室舒張功能障礙。
　　第二部分大鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的左室肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰中甲羥戊酸途徑相關(guān)酶表達(dá)變化
　　研究背景:
　　射血分?jǐn)?shù)正常心衰（HFpEF）是以左室舒張功能障礙為主要表現(xiàn)的心力衰竭，其發(fā)病率和死亡率極高。目前對(duì)HFpEF無(wú)有

5、效的治療措施，其預(yù)后極差。部分臨床研究發(fā)現(xiàn)，他汀類藥物對(duì)改善HFpEF預(yù)后有一定的幫助。他汀類藥物是甲羥戊酸途徑限速酶（3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶）的抑制劑。甲羥戊酸途徑在細(xì)胞代謝過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，其異常會(huì)導(dǎo)致諸多疾病，包括心血管疾病。在高血壓病人中，一半以上的病人有左室舒張功能障礙。而壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的左室肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰中甲羥戊酸途徑相關(guān)酶表達(dá)尚不清楚。
　　目的:
　　探索大鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的左室肥

6、厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰中甲羥戊酸途徑相關(guān)酶表達(dá)變化及其與心血管重構(gòu)的關(guān)系。
　　方法:
　　利用第一部分建立的大鼠壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的左室肥厚和射血分?jǐn)?shù)正常心衰模型來(lái)探索左室、腹主動(dòng)脈及肝臟組織中甲羥戊酸途徑相關(guān)酶及下游小G蛋白表達(dá)變化，具體包括:HMG-CoA還原酶（HMGR）、法尼基焦磷酸合酶(FDPS)、角鯊烯合成酶(SQS)、法尼基轉(zhuǎn)移酶α亞基(FNTA)、法尼基轉(zhuǎn)移酶β亞基(FNTB)、牻牛兒牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶(GGTase

7、-Ⅰ)、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)、磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（P-ERK1/2）、Ras和RhoA。同時(shí)用G-LISA法檢測(cè)左室和腹主動(dòng)脈組織Ras、RhoA、Cdc42和Racl活性。
　　結(jié)果:
　　術(shù)后3、5、8和14周，與假手術(shù)組(sham)比較，腹主動(dòng)脈縮窄組(AAC)左室組織中，HMGR、FDPS、FNTA、FNTB和P-ERK1/2蛋白表達(dá)明顯增高，而GGTase-Ⅰ蛋白僅在術(shù)后14周增高;AAC組縮窄

8、近端腹主動(dòng)脈組織FDPS、FNTA和FNTB蛋白表達(dá)在各時(shí)間段均明顯增高，而縮窄遠(yuǎn)端腹主動(dòng)脈組織GGTase-Ⅰ蛋白表達(dá)較sham組及縮窄近端腹主動(dòng)脈組織均降低，P-ERK1/2蛋白表達(dá)在AAC組縮窄血管兩端較sham組均明顯增高。肝臟組織各蛋白表達(dá)均未發(fā)生改變。
　　術(shù)后3、5、8和14周，AAC組左室組織Ras活性較sham組均明顯增強(qiáng)，RhoA活性僅在14周增強(qiáng)。術(shù)后3、5、8和14周，AAC組縮窄兩端血管Ras活性較sha