UrotensinⅡ對肺癌炎癥微環(huán)境的調控作用及機制.pdf

1、第一部分：UrotensinⅡ對荷瘤裸鼠皮下移植瘤生長的影響
　　目的：觀察移植瘤的體積和重量，研究UⅡ對荷瘤裸鼠皮下移植瘤生長的影響。
　　方法：將非小細胞肺癌A549細胞接種于裸鼠皮下建立移植瘤模型，待移植瘤平均直徑達到4mm后隨機分為四組：對照組、UⅡ組(40μg/kg)、DDP組(25mg/kg)、DDP+UⅡ組(DDP25mg/kg和UⅡ40μg/kg)，每周給予相應的藥物兩次，連續(xù)給藥7周。每周測量移植瘤體積，繪

2、制各組裸鼠移植瘤生長曲線。實驗結束后取出移植瘤稱重。
　　結果：1.所有接種肺癌細胞系A549的裸鼠均成瘤。2.與對照組相比，UⅡ組裸鼠移植瘤生長曲線更加陡直，而DDP組裸鼠移植瘤生長曲線平緩；與DDP組相比，DDP+UⅡ組裸鼠移植瘤生長曲線較陡直。3.與對照組相比，UⅡ組裸鼠移植瘤重量顯著增大(P<0.05)，而DDP組裸鼠移植瘤重量顯著減小(P<0.01)；DDP+UⅡ組裸鼠移植瘤重量雖比DDP組移植瘤大，但兩組移植瘤重量差別

3、無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結論：UⅡ能明顯促進荷瘤裸鼠移植瘤的生長。
　　第二部分：UrotensinⅡ對肺癌炎癥微環(huán)境的影響及機制
　　目的：觀察UⅡ對肺癌組織中腫瘤相關巨噬細胞(TAMs)浸潤及炎癥因子表達水平的影響及UⅡ對NF-κB活化的影響，初步探討UⅡ對肺癌炎癥微環(huán)境的影響及機制。
　　方法：1.免疫組織化學染色技術(IHC)檢測腫瘤組織中CD68+TAMs浸潤情況。2.酶聯免疫吸附試驗(EL

4、ISA)法檢測IL-6、TNF-α、MMP-9在腫瘤組織中的表達水平。3.Western blot法檢測各組腫瘤組織中p-NF-κB和NF-κB的表達。
　　結果：1.IHC檢測結果顯示，CD68陽性染色呈棕黃色，主要表達于細胞漿中，與對照組相比，UⅡ組陽性染色明顯增強，而對照組陽性染色明顯減弱；而與DDP組相比，DDP+UⅡ組陽性染色較強。統(tǒng)計學分析顯示，與對照組相比，UⅡ組CD68的積分光密度(IOD)值顯著增高(P<0.01

5、)，DDP組則顯著降低(P<0.01)；與DDP組相比，DDP+UⅡ組IOD值明顯增高(P<0.01)。2.ELISA檢測結果顯示，與對照組比較，UⅡ組IL-6、MMP-9和TNF-α的水平顯著升高(P<0.05)；而DDP組IL-6、MMP-9和TNF-α的表達水平與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3.Western blot檢測結果顯示，各組間NF-κB的表達水平沒有明顯差異。但與對照組相比，UⅡ組p-NF-κB表達水平

6、明顯升高(P<0.05)，DDP組p-NF-κB的表達水平則顯著降低(P<0.01)。與DDP組相比，DDP+UⅡ組p-NF-κB的表達水平明顯升高(P<0.01)。
　　結論：1.UⅡ可增加肺癌組織中浸潤的TAMs的數量，誘導IL-6、TNF-α、MMP-9等炎性細胞因子的表達，提示UⅡ能夠促進肺癌炎癥微環(huán)境的形成。2。UⅡ能促進NF-κB的活化，這可能是其誘導下游炎癥分子IL-6、TNF-α等的表達上調，促進肺癌進展的機制之一