激素受體與HER2在乳腺癌不同制片技術中的表達水平比較及其臨床意義研究.pdf

1、目的:
　　 雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)在乳腺癌的形成、發(fā)展和對激素反應中起關鍵作用。ER或PR陽性的乳腺癌病例均可采用內分泌治療。HER2基因表達的蛋白c-erbB-2作為乳腺癌的預后指標、治療反應預測指標和治療靶點起作用,抗HER2單克隆抗體Herceptin治療乳腺癌被廣泛應用,明顯地延長乳腺癌患者的生存時間和改善生活質量。由于內分泌治療和新輔助化療的出現(xiàn)和廣泛應用,以及化療后激素受體的表達水平可能與化療前不一

2、致,所以術前檢測乳腺癌ER、PR的表達水平顯得更為重要。細針穿刺細胞學檢查對于乳腺癌術前診斷是一項簡單而實用的檢查項目,可用于檢測ER、PR和c-erbB-2表達。但由于細胞學制片技術的原因,其檢測結果尚不十分穩(wěn)定,尤其是不利于同時檢測多個抗體。
　　 雄激素受體(AR)在前列腺癌中的研究較多,但在乳腺癌中的生物學作用一直是臨床上和基礎研究中被忽略的領域。AR在乳腺癌中表達的臨床意義尚無肯定的結論。AR的表達水平是否與乳腺癌的生

3、物學行為有關,AR與ER、PR和c-erbB-2之間的表達是否存在相關性,AR在不同乳腺癌分子分型中的表達水平是否存在差別等問題,目前尚無滿意的答案。
　　 本文旨在改進傳統(tǒng)免疫細胞化學制片方法,提高乳腺癌術前ER、PR和c-erbB-2檢測結果的可靠性;采用組織芯片技術檢測乳腺癌AR的表達水平并探討其臨床意義。
　　 方法:
　　 對50例乳腺癌病例進行細針穿刺細胞學檢查,檢查前簽署知情同意書,穿刺獲得細胞學標

4、本后分別進行傳統(tǒng)涂片和液基細胞制片,然后進行免疫細胞化學染色,并對手術后的標本進行免疫組化染色,分別比較ER、PR和c-erbB-2在不同制片方法中的表達水平。液基細胞學制片采用利普液基細胞學產品,免疫組化制片采用SP法。
　　 采用組織芯片技術把200例乳腺癌手術標本制成二個組織芯片,每個組織芯片包含100個乳腺癌位點,采用免疫組化法En Vision法分別檢測每個乳腺癌組織芯片中AR、ER、PR和c-erbB-2的表達水平,

5、分析AR與乳腺癌臨床病理指標的關系以及AR與ER、PR、c-erbB-2和乳腺癌分子分型的關系。
　　 AR、ER、PR免疫組化染色結果判斷采用半定量法,≥10％細胞核著色視為陽性反應。根據(jù)染色強度分為陰性、弱陽性、中等陽性和強陽性,相應評分為0、1、2和3分。觀察每張切(涂)片中陽性細胞百分數(shù)。陽性細胞百分數(shù)與陽性強度的乘積即為免疫反應得分,范圍為0-300分。免疫反應得分10分以上視為陽性反應。按照乳腺癌HER2檢測指南,c

6、-erbB-2蛋白的評分0、1+視為陰性,3+視為陽性,2+進行FISH檢測,陽性信號和對照信號的比值大于2.2視為HER2基因擴增。
　　 ER和PR在液基細胞涂片、傳統(tǒng)涂片和組織切片中的陽性表達率的比較采用X2檢驗,AR與乳腺癌臨床病理學指標的關系以及與乳腺癌分子分型的關系采用X2檢驗,c-erbB-2在液基細胞涂片、傳統(tǒng)涂片和組織切片中的表達水平的差異用Kruskal-Wallis秩和檢驗,P＜0.05具有統(tǒng)計學意義。

7、r>　　 結果:
　　 在液基細胞涂片中腫瘤細胞呈散在或彌漫分布,背景清晰,易于觀察和判斷。在傳統(tǒng)細胞涂片中腫瘤細胞呈團塊狀或成片分布,背景中充滿大量紅細胞和壞死物等引起的非特異性著色,對觀察和判斷造成一定的干擾。液基細胞涂片、傳統(tǒng)涂片和石蠟切片的ER陽性表達率分別為54％(27/50)、50％(25/50)和56％(28/50),PR的表達率分別為44％(22/50)、38％(19/50)和52％(26/50),c-erbB

8、-2中等強度以上陽性表達率分別為58％(29/50)、54％(27/50)和52(26/50)。ER、PR和c-erbB-2在三種制片方法的乳腺癌細胞中的表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 乳腺癌AR的陽性表達率為64.5％(129/200),AR在乳腺癌中的表達與年齡、月經(jīng)狀況、腫瘤部位、淋巴結轉移、腫瘤組織學類型、腫瘤TNM分期、是否浸潤以及原位癌級別無明顯相關性(P＞0.05),而與腫瘤體積和浸潤性癌的組織學分級

9、有關(P＜0.05)。多數(shù)ER和PR陽性的腫瘤同時也表達AR,114例ER陽性的病例中有99例(86.84％)AR也呈陽性表達,90例PR陽性的病例中77例(85.56％)AR陽性表達。AR的表達與ER和PR呈明顯的相關性(P＜0.05)。AR在不同分子分型的乳腺癌中的表達率不同,在腺管A型和腺管A-HER2型中的表達率最高,腺管B型和腺管B-HER2型次之,而在HER2型和三陰性中最低(P＜0.05)。
　　 結論: