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1、[目的]骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSC),也被稱(chēng)為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal cells),是存在于骨髓基質(zhì)中一種成體干細(xì)胞,來(lái)源于中胚層,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化功能,可以分化為多種不同的組織細(xì)胞,是細(xì)胞工程學(xué)和組織工程學(xué)研究中的一種理想種子細(xì)胞。如果BMSC容易接受外源性基因而且穩(wěn)定表達(dá),結(jié)合其多向分化能力,BMSC將會(huì)在組織工程、細(xì)胞移植、基因治
2、療等領(lǐng)域得到十分廣闊的應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)的主要目的為: 1.建立一種體外分離、培養(yǎng)擴(kuò)增大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的方法,為進(jìn)一步研究和利用該細(xì)胞奠定基礎(chǔ); 2.研究脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行基因修飾的可行性和有效性,為研究骨髓基質(zhì)細(xì)胞在組織工程和基因治療中的應(yīng)用提供。 [方法]用淋巴細(xì)胞分離液分離出大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,并用含20%(體積分?jǐn)?shù))胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),胰酶消化傳代,擴(kuò)增大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞。取第3~5代BMSC,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將外源基
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