MIP-2在棘阿米巴性角膜炎中的表達.pdf

1、青島大學碩士學位論文MIP2在棘阿米巴性角膜炎中的表達姓名：車成業(yè)申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學（角膜病、白內障）指導教師：趙桂秋20080601青島人學碩：Ij學位論文MIP2在棘阿米巴性角膜炎中的表達中文摘要目的：建立有效的棘阿米巴角膜炎動物模型，檢測棘阿米巴角膜炎中巨噬細胞炎癥蛋白一2(MIP一2)的表達并探討MIP一2在棘阿米巴角膜炎發(fā)病機制中的作用，觀察干擾MIP2對棘阿米巴角膜炎的影響。方法：l、健康加卡利亞倉鼠80只隨機分

2、為4組，每組20只。刮除倉鼠右眼角膜中央區(qū)50％的二皮，對照組覆蓋無菌角膜接觸鏡并滴入PBS液，接觸鏡組覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入PBS液，懸液組覆蓋無菌角膜接觸鏡并滴入阿米巴懸液，混合組覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入阿米巴懸液，在模型建立48、72小時后進行研究觀察。2、健康加卡利亞倉鼠80只隨機分為4組，每組20只。空白對照組不予任何處理；條件對照組刮除倉鼠右眼角膜中央區(qū)50％的上皮，覆蓋無菌角膜接觸鏡并滴入PBS液；實驗一、二

3、組刮除右眼上皮后覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入阿米巴懸液。分別于接種后1d、2d、3d、5d、7d用半定量逆轉錄聚合酶鏈反應方法(RT—PCR)檢測各組中MIP一2的表達(空白對照組、條件對照組和實驗一組取右眼角膜，實驗二組取左眼角膜)，并對不同時間點角膜組織行HE染色及光鏡觀察。3、健康加卡利亞倉鼠80只隨機分為4組，每組20只。刮除所有倉鼠右眼角膜中央區(qū)50％的上皮，覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入阿米巴懸液?？瞻讓φ战M不予任何處理；

4、條件對照組在模型制成48小時角膜內注射PBS液；實驗一組注射TNFa；實驗二組注射rMIP一2。分別于接種后3d、5d、7d、12d、18d用半定量逆轉錄聚合酶鏈反應方法檢測各組中l(wèi)IlIP一2的表達，并對不同時間點角膜組織行HE染色及光鏡觀察。結果：l、混合組方法能成功地建立穩(wěn)定的加卡利亞倉鼠棘阿米巴角膜炎動物模型，并經角膜刮片用10％氫氧化鉀封片鏡檢、角膜組織原蟲培養(yǎng)和病理切片染色檢查證實。2、空白對照組、條件對照組和實驗二組各個觀