腰椎軟骨終板細胞凋亡與椎間盤退變的關系研究.pdf

1、背景和目的:腰褪痛是臨床常見病之一,人群中大部分都有腰腿痛的經(jīng)歷。目前多數(shù)研究表明腰椎問盤退變(IDD)在腰腿痛中起重要作用。但導致腰椎間盤退變的因為,尤其是與其密切相關的椎體軟骨終板退變及細胞凋亡與其之間的關系尚未完全明了。本研究擬通過建立腰椎退變的動物模型,研究腰椎椎體軟骨終板細胞凋亡與腰椎間盤退變之間的關系,確定凋亡在其退變過程中的作用,為腰椎間盤退變性疾病的預防和治療提供新手段。
　　 方法：選取健康清潔型大白鼠24只,

2、隨機分為手術實驗組和手術對照組。手術實驗組沿L1-L6棘突做正中切口,剝離椎旁肌,切除L1-L6的棘上、棘間韌帶及兩側關節(jié)突后外1/2,誘發(fā)腰椎加速退變,手術對照組僅切開皮膚后縫合。分別于術后9周、18周、36周對兩組動物施行過度麻醉處死,完整取下包含上、下椎體的椎間盤。對腰椎標本行矢狀位切片,分離軟骨終板和椎間盤。腰椎間盤按Thompson椎間盤退變病理分級標準進行分級評定。將軟骨終板石蠟包埋切片,做HE染色和TUNNEL染色。評估軟

3、骨終板消失狀況,計數(shù)腰椎椎體軟骨終板細胞凋亡數(shù)量。
　　 結果：
　　 1.腰椎間盤退變的組織學表現(xiàn)HE染色切片,評估腰椎間盤退變程度。9周手術對照組大鼠和9周手術實驗組大鼠腰椎間盤結構基本正常。18周手術對照組大鼠腰椎間盤出現(xiàn)輕度退變表現(xiàn),纖維環(huán)前緣軟骨組織增生,排列不規(guī)則,髓核偏向后方,髓核皺縮,纖維環(huán)出現(xiàn)裂隙。椎體邊緣光滑。18周手術實驗組大鼠腰椎問盤明顯退變,纖維環(huán)部分纖維化,纖維環(huán)和髓核分界不明顯,椎體前后緣有

4、骨贅形成。36周手術對照組大鼠腰椎間盤與18周相比退變明顯,36周手術實驗組大鼠腰椎間盤嚴重退變,纖維環(huán)完全纖維化,髓核消失,椎體前后緣骨贅。
　　 2.HE染色觀察腰椎軟骨終板細胞凋亡狀況軟骨終板的結構隨年齡增長逐漸退變。軟骨終板形態(tài)變化明顯,退變隨時間加速。術后9周,手術對照組和手術實驗組腰椎軟骨終板較厚,可見少量散在分布的軟骨陷窩。術后18周,終板結構出現(xiàn)局部消失,可見散在分布的軟骨陷窩、凋亡軟骨細胞和凋亡小體。術后36周

5、,退變顯著,終板消失顯著。
　　 3.Tunel染色比較手術對照組和手術實驗組軟骨終板內細胞凋亡率9周實驗組和對照組軟骨終板內均可見散在凋亡細胞,未見差別。18周實驗組和對照組均可見凋亡細胞較9周增多,以實驗組增多明顯,兩者出現(xiàn)差別。36周實驗組比對照組凋亡細胞數(shù)量顯著增多,兩者出現(xiàn)明顯差別。
　　 結論：
　　 1.腰椎退變實驗模型加速了腰椎間盤退變和終板細胞凋亡數(shù)量。
　　 2.腰椎軟骨終板細胞凋亡是