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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文兩步極體活檢對小鼠卵母細胞體外受精和胚胎發(fā)育的影響姓名:曹彤申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科指導(dǎo)教師:孫瑩璞20050501邦卅l大學(xué)2005屆傾L研究生畢業(yè)論文兩步極體活檢對小鼠卵母細胞體外受精和胚胎投育的影響研究對象812周齡雄性昆明小白鼠40只,810周齡雌性昆明小白鼠60只,由河南省實驗動物中心提供。小鼠飼養(yǎng)暗周期14小時,光照10小時,自由取水和飲食。研究方法1當(dāng)日下午4點隨機取性成熟雌鼠腹腔注射HMG10I
2、U/02ml,48h腹腔注射HCG10IU/02ml,14一J7b取卵并放于C02孵箱中孵育2—4h。取卵后收集鼠精,孵育12h。去顆粒的成熟MII期(metaphase11)卵母細胞(1PB完整)行ICSI。45h后觀察受精情況,受精后24h、48h觀察卵裂情況并胚胎分級,受精后96144h觀察囊胚形成和孵出情況。2每次取出的卵隨機分為8組進行處理,按處理不同分為:組1,ICSI后透明帶打孔;組2,ICSI后透明帶打孔取第一極體;組3
3、,ICSI后透明帶打孔取第一極體,受精后從同一孔中取第二極體;組4,受精后透明帶打孔;組5,受精后透明帶打孔同時取出一、二極體;組6,68細胞劃透明帶打孔:組7,6_8細胞期透明帶打孔取出1個卵裂球;組8,對照組,只行ICSI。3兩兩比較各組問卵母細胞受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率有無明顯差異,比較受精后96h囊胚形成率及囊胚質(zhì)量,比較囊胚擴張率、發(fā)動孵出率和完全孵出率有無差異。結(jié)果1、不同時機透明帶激光打孔對小鼠卯母細胞體外受精和胚胎發(fā)育
4、的影響ICSI后打孔組、受精后;TTL組和8細胞期打孔組分別與對照組比較,小鼠卵母細胞受精率、卵裂率、4細胞、8細胞形成率和優(yōu)質(zhì)胚胎率差異均無顯著性,PO05。各打孔組與對照組比較,受精后96hI級、lI級、III級囊胚形成率和總囊胚形成率也均無明顯籌異,P005;優(yōu)質(zhì)囊胚(即l級lI級囊胚)占囊胚總數(shù)的比率也相似,P005。各打jL組與對照組比較,囊胚擴張率無明顯籌異,PO05。ICSI后打孔組囊胚發(fā)動孵出的比率(886%)明顯高于對
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