VOCs指紋圖快速質譜鑒定結核分枝桿菌復合群的研究.pdf

1、目的：探討質譜技術對結核分枝桿菌復合群相關標記物檢測和鑒定，判斷VOCs標記物及VOCs指紋圖對結核病的診斷和鑒別診斷價值。
　　方法：采用表面解吸常壓化學電離質譜（SDAPCI-MS）技術對結核分枝桿菌復合群（Mycobacteriumtuberculosiscomplex,MTC）及其相似菌屬如非結核分枝桿菌（Nontuberculosismycobacteria,NTM）、諾卡氏菌、馬紅球菌、鏈霉菌及齲齒羅氏菌的培養(yǎng)基上層行

2、VOCs檢測，同時對臨床常見細菌和真菌檢測，以確定MTC特異性標記物及釋放時間規(guī)律。通過碰撞誘導解離（CID）技術鑒定特異譜峰的分子量和分子結構式，并用Matlab對其行主成分分析（PCA）以評估不同種屬細菌VOCs之間的關系。
　　結果：質譜檢測所得VOCs指紋圖可準確鑒別MTC與多種在生物學特性和臨床感染上的相似菌屬，主成分分析可將所有菌明顯的相互區(qū)分。煙酸甲酯（m/z138）特異性存在于MTC培養(yǎng)基上層，在培養(yǎng)第9天，肉眼可

3、見菌落之前即可檢出。m/z140和m/z152在MTC培養(yǎng)基上層中含量顯著高于其他菌屬（P<0.01,Fisher’s精確檢驗），是MTC相關標記物。本實驗中所有菌共同產生的VOCs主要有2-苯乙醇（m/z122），甲酸乙酯（m/z74），丙酸（m/z76），苯甲酸（m/z108），普遍存在于其他細菌培養(yǎng)基上層，是細菌在代謝過程中有機酸或醇類的積聚。
　　結論：SDAPCI-MS通過檢測微生物的揮發(fā)性代謝產物，快速、高效的作出MT