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文檔簡介
1、目的:
觀察體外培養(yǎng)的人RPE細胞在常氧及缺氧狀態(tài)下TLR4和VEGF的表達變化;觀察用TLR4的促進劑LPS處理RPE細胞后再給與缺氧處理,TLR4和VEGF的表達及兩者的相關(guān)性。
方法:
1.1‰COCL2分別處理RPE細胞0h、2h、4h、8h、12h和24h建立化學缺氧模型,用免疫熒光的方法觀察RPE細胞中TLR4的表達,用RT-PCR和Westernblot方法檢測細胞中TLR4和VEGF的表達;
2、
2.LPS處理RPE細胞3h后再分別給與缺氧處理0h、2h、4h、8h、12h和24h,用RT-PCR和Westernblot檢測細胞中TLR4和VEGF的表達。結(jié)果:
1.激光共聚焦顯微鏡觀察,常氧狀態(tài)下RPE細胞有TLR4的微弱表達,隨缺氧時間延長,TLR4表達增強,缺氧時間12h后達到峰值;TLR4和VEGFmRNA及蛋白表達均隨著缺氧時間延長增強,缺氧12h后表達最強;
2.經(jīng)過LPS預處理后再進
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