Siemens大皰性魚鱗病一家系KRT2基因檢測和分析.pdf

1、[目的]
　　1.報道一個Siemens大皰性魚鱗病家系的臨床病理和超微結構特點。
　　2.檢測該例患者及其家族成員中KRT2基因突變情況。
　　3.觀察該例患者表皮內角蛋白2表達分布情況。
　　[方法]
　　1.采集1個Siemens大皰性魚鱗病家系的臨床資料及外周靜脈血，提取基因組DNA，設計包括KRT2基因全部外顯子及內含子與外顯子拼接位點的6對引物，用克隆技術、PCR擴增KRT2基因，并進行雙向DN

2、A測序。
　　2.該例Siemens大皰性魚鱗病患者皮損活檢標本進行常規(guī)病理檢查和透射電鏡觀察，同時應用免疫組化及免疫熒光檢測KRT2蛋白在表皮內的表達分布情況。
　　3.收集100例正常人外周靜脈血提取基因組DNA，查找KRT2基因突變情況進行對照分析。另收集10例正常人膝部皮膚活檢標本，應用免疫組化和免疫熒光檢測KRT2蛋白在表皮內的表達分布情況進行對照分析。
　　[結果]
　　1.基因檢測發(fā)現(xiàn)3例患者的KR

3、T2基因在1號外顯子上出現(xiàn)c.554T＞C(p.Leu185Pro)雜合突變，而其他7名家庭成員及100例正常對照者此位點未發(fā)現(xiàn)突變。另外在基因位點301處存在一插入突變A/A＞GGCTTTGGAGGCGGCAGCG，但在正常人對照組內檢測到該位點有相同及類似突變，考慮為基因多態(tài)性位點。
　　2.皮損組織病理學顯示角化過度，棘層肥厚，棘層上方及顆粒層可見輕度細胞松解現(xiàn)象，真皮淺層少量炎細胞浸潤。
　　3.電鏡觀察示基底層上的

4、角質形成細胞中可以見到異常聚集成團塊狀的角蛋白絲。
　　4.免疫組化和免疫熒光示患者皮損中角蛋白2表達與正常人不同，顆粒層和棘層上部的表達明顯減弱。
　　[結論]
　　1.該家系四代共10人，其中3人發(fā)病。經基因檢測證實該家系所患疾病為Siemens大皰性魚鱗病。該家系Siemens大皰性魚鱗病患者臨床表型由KRT2基因c.554T＞C(p.Leu185Pro)雜合突變所致。
　　2.KRT2基因突變導致角蛋白2