透明質(zhì)酸酶對(duì)眼眶成纖維細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的：觀察透明質(zhì)酸酶對(duì)體外培養(yǎng)的正常人的球后成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用以及其對(duì)細(xì)胞分泌的透明質(zhì)酸的影響，為臨床上透明質(zhì)酸酶治療甲狀腺相關(guān)眼病提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 方法： 1.組織塊法培養(yǎng)人眶成纖維細(xì)胞，觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況及特性，HE染色了解其形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，免疫組化染色鑒定細(xì)胞來源。 2.應(yīng)用濃度分別為5、10、25、50、100μg/ml的透明質(zhì)酸酶，分別作用于培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞，在24、48、72小時(shí)觀察成纖維細(xì)胞形態(tài)的

2、變化，應(yīng)用MTT比色法、放射免疫分析法觀察不同濃度透明質(zhì)酸酶對(duì)眶成纖維細(xì)胞增殖及分泌透明質(zhì)酸的作用。 結(jié)果： 1.體外培養(yǎng)的眶成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)良好，傳代穩(wěn)定，細(xì)胞呈梭形或星形，免疫組化鑒定波形蛋白陽性。 2.不同濃度(5～100μg/ml)的透明質(zhì)酸酶作用于眶成纖維細(xì)胞24、48、72小時(shí)，MTT法所測(cè)量的OD值雖然低于正常對(duì)照組，但經(jīng)SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，差異無顯著性(P＞0.05)。 3.

3、放射免疫法測(cè)量細(xì)胞培養(yǎng)上清液中透明質(zhì)酸的量，不同濃度的透明質(zhì)酸酶(5～100μg/ml)作用于眶成纖維細(xì)胞24、48、72小時(shí)后，培養(yǎng)上清液中HA含量明顯減少，與對(duì)照組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。并且隨著藥物濃度的增加及作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HA的含量越少。 結(jié)論： 1.本實(shí)驗(yàn)成功培養(yǎng)出眶成纖維細(xì)胞，細(xì)胞傳代穩(wěn)定，為甲狀腺相關(guān)眼病的研究提供了實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?2.透明質(zhì)酸酶對(duì)眶成纖維細(xì)胞的增殖的