趨化因子受體CXCR4及其配體SDF-1在成釉細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)與意義.pdf

1、目的：
　　成釉細(xì)胞瘤(Ameloblastomas，ABs)是發(fā)生于頜骨內(nèi)的牙源性上皮來(lái)源的腫瘤，在國(guó)內(nèi)其發(fā)生率約占牙源性腫瘤的60％。腫瘤內(nèi)主要含有成釉器樣結(jié)構(gòu)，但是無(wú)釉質(zhì)或其他牙體硬組織形成。大多數(shù)腫瘤發(fā)生于頜骨內(nèi)，常導(dǎo)致頜骨的膨大和面部的變形。雖屬于良性腫瘤，但其具有局部侵襲和易復(fù)發(fā)的生物學(xué)行為，少數(shù)病例發(fā)生惡變后可以導(dǎo)致區(qū)域性淋巴結(jié)、肺等遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移，甚至有發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的零星報(bào)道。WHO2005年新分類(lèi)將ABs分為4種臨床

2、病理行為不同的變異型，包括:實(shí)性/多囊型、骨外/外周型、促結(jié)締組織增生型和單囊型。這些亞型在患者年齡、部位、影像學(xué)表現(xiàn)以及臨床預(yù)后等方面均存在差異，以往對(duì)于其治療多采用刮除術(shù)，由于其復(fù)發(fā)機(jī)率較大，所以目前多以擴(kuò)大切除術(shù)為主，但仍有小部分患者有復(fù)發(fā)傾向。成釉細(xì)胞瘤大多數(shù)來(lái)源于牙齒正常發(fā)育完成后殘余的牙源性上皮剩余，少部分來(lái)自口腔黏膜上皮基底細(xì)胞、含牙囊腫、始基囊腫和角化囊腫襯里上皮的演變。鑒于本病至今沒(méi)有有效的治療方法，因此研究其發(fā)病機(jī)制

3、，尋找抑制腫瘤新的靶點(diǎn)，對(duì)預(yù)防和治療本病有著較重要的意義。趨化因子基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)是CXC趨化因子家族的重要成員，其與特異性受體CXCR4結(jié)合后參與機(jī)體造血、干細(xì)胞生成、白細(xì)胞浸潤(rùn)、神經(jīng)和心血管形成和HIV感染[1]等一系列生理病理過(guò)程。目前的許多文獻(xiàn)報(bào)道證實(shí)了趨化因子受體CXCR4及其配體SDF-1在癌癥中的進(jìn)展或啟動(dòng)中都發(fā)揮著重要的作用。因此推測(cè)SDF-1/CXCR4可能與成釉細(xì)胞瘤的發(fā)生有一定的相關(guān)性。所以探討趨

4、化因子受體CXCR4及其配體SDF-1在成釉細(xì)胞瘤中蛋白和mRNA水平上的變化與成釉細(xì)胞瘤上述生物學(xué)行為到底存在著怎樣的關(guān)聯(lián)性是本實(shí)驗(yàn)的研究目的。
　　材料與方法：
　　80例成釉細(xì)胞瘤存檔蠟塊均來(lái)自2007年至2012年中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院病理科，新鮮手術(shù)標(biāo)本-86℃凍存。診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)WHO2005年最新分類(lèi)，以口腔鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)，正常口腔黏膜(NOM)做對(duì)照，用免疫組織化學(xué)染色SP法觀察SDF-1和CXCR4

5、蛋白在ABs中的表達(dá)與分布情況。30例成釉細(xì)胞瘤新鮮手術(shù)標(biāo)本均取自于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院外科手術(shù)，用Western-blot法和逆轉(zhuǎn)錄Real-Time PCR法分別檢測(cè)ABs中SDF-1和CXCR4蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　一、ABs中SDF-1免疫組化結(jié)果
　　SDF-1在ABs中大部分表達(dá)于胞質(zhì)，偶見(jiàn)細(xì)胞核表達(dá)，以中度陽(yáng)性強(qiáng)陽(yáng)性為主，細(xì)胞質(zhì)陽(yáng)性為85％(68/80)，正常黏膜上皮細(xì)胞無(wú)表達(dá)，在口腔鱗狀細(xì)胞

6、癌(OSCC)呈陽(yáng)性表達(dá)。
　　二、ABs中SDF-1蛋白表達(dá)結(jié)果
　　用Western-blot方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中SDF-1表達(dá)情況。結(jié)果顯示，SDF-1在ABs(0.72±0.14)中的表達(dá)明顯高于正常黏膜(0.48±0.04)中的表達(dá)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)(0.83±0.09)組織中的表達(dá)無(wú)明顯差別(P＞0.05)。
　　三、ABs中S

7、DF-1基因Real-Time PCR表達(dá)結(jié)果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH作內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中SDF-1的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果顯示30例ABs中有20例SDF-1在ABs中的表達(dá)相對(duì)于正常黏膜組織高4.06倍，但相對(duì)于口腔鱗癌組織要低2.25倍。
　　四、ABs中CXCR4免疫組化結(jié)果
　　CXCR4在ABs中有胞質(zhì)的表達(dá)，并可見(jiàn)少量的細(xì)胞核表達(dá)，以中度陽(yáng)性強(qiáng)陽(yáng)性為主，胞質(zhì)陽(yáng)性為87.5％(70/8

8、0)，正?？谇火つど掀ぜ?xì)胞無(wú)表達(dá)，在口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)呈陽(yáng)性表達(dá)。
　　五、ABs中CXCR4蛋白表達(dá)結(jié)果
　　用Western-blot方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中SDF-1表達(dá)情況。結(jié)果顯示，CXCR4在ABs(0.72±0.12)中的表達(dá)明顯高于正常黏膜(0.43±0.06)中的表達(dá)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)(0.78±0.09)組織中的表

9、達(dá)無(wú)明顯差別（P＞0.05）。
　　六、ABs中CXCR4基因Real-Time PCR表達(dá)結(jié)果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中CXCR4的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果顯示30例ABs中有21例SDF-1在ABs中的表達(dá)相對(duì)于正常黏膜組織高3.82倍，但相對(duì)于口腔鱗癌組織要低1.03倍。
　　結(jié)論：
　　ABs中SDF-1和CXCR4在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平上表達(dá)都上調(diào)，并且SDF-