斑馬魚模型檢測環(huán)境內(nèi)分泌干擾作用的終點效應.pdf

1、棋旦大學碩士學位論文斑馬魚模型檢測環(huán)境內(nèi)分泌干擾作用的終點效應EndpointEffectsinZebrafishModelforDetectingEnvironmentalDisruption院系：公共衛(wèi)生學院專業(yè)：衛(wèi)生毒理學姓名：李潔斐導師：金泰虞教授李衛(wèi)華副教授丁訓誠教授完成日期：2006年5月8日●●●復日大學頌十學位論文斑馬魚模型椅測環(huán)境內(nèi)分泌十擾作用的終點效應斑馬魚模型檢測環(huán)境內(nèi)分泌干擾作用的終點效應中文摘要環(huán)境內(nèi)分泌干擾物

2、(EDCs)是指對天然激素的生成、釋放、輸送、代謝、結(jié)合、效應或消除過程具有干擾作用的外來物質(zhì)，其中環(huán)境雌激素(EEs)是最為重要的一類。EEs廣泛存在于自然界中，其品種多、應用廣，在環(huán)境中穩(wěn)定不易被破壞，在生態(tài)環(huán)境中可通過食物鏈被富集，它們對人類健康的危害已不容忽視。環(huán)境雌激素的檢測手段最初局限于化學檢測，但方法復雜，樣品的前處理技術(shù)要求高，樣品檢測價格昂貴，限制了化學方法直接運用于環(huán)境監(jiān)測和保護中。本研究利用生物技術(shù)補充或替代化學技

3、術(shù)的理念，應用斑馬魚模型檢測環(huán)境雌激素。研究中我們構(gòu)建了一套國產(chǎn)化的斑馬魚養(yǎng)殖平臺，進行了幼魚及成年雄魚部分生命周期實驗以檢測17Q炔雌醇、雙酚A及氯化鎘的雌激素活性以驗證此動物模型和檢測方法的有效性，并通過對一系列終點指標的研究和探討，篩選出檢測EEs較敏感的指標，為國內(nèi)檢澳IJEEs提供一個新的動物模型和檢測方法。研究結(jié)果顯示斑馬魚是檢測環(huán)境雌激素較理想的模型。VTG是一個相對敏感、特異、穩(wěn)定的指標。但對于檢測鎘等重金屬類的環(huán)境內(nèi)分

4、泌干擾物時，VTG可能并不是一個最敏感的指標，建議結(jié)合血中類固醇激素的濃度，孵化率、產(chǎn)卵率等終點指標對化學物的雌激素樣活性進行綜合評價。ERQmRNA和VTGmRNA在表達上基本是一致的，但由于化學物作用機制的不同，導致在檢測不同的環(huán)境雌激素時其敏感性存在一定差異，建議ERQ基因可作為檢測EEs的輔助指標。HSPTOmRNA雖然不是雌激素特異誘導的基因，但鑒于其高度的敏感性，建議可作為接觸EEs的預警指標。性別比例、性腺的組織學檢查是檢

5、測EEs客觀的終點指標，當環(huán)境化學物使斑馬魚的性別發(fā)生逆轉(zhuǎn)，雌魚比例明顯升高，組織學檢查出現(xiàn)雌雄兼體或性腺發(fā)育明顯受抑制時，可明確地認為該化學物具有雌激素樣活性。但由于這兩個指標沒有VTG蛋白、VTGmRNA及HSP70mRNA等分子生物學指標敏感，故推薦這兩項指標在篩選和檢測EEs時可作為進一步確認的指標。同時本研究結(jié)果還表明了在檢測EEs時幼魚暴露實驗比成年雄魚實驗更為敏感。關(guān)鍵詞：環(huán)境雌激素，斑馬魚，生命周期實驗，卵黃蛋白原(VT