選擇性環(huán)氧化酶2抑制劑塞來昔布聯(lián)合含靶向基因白介素24的溶瘤腺病毒抗膀胱癌作用的體外研究.pdf

1、目的：在體外評(píng)估CELECOXIB聯(lián)合ZD55-IL-24選擇性殺傷尿路上皮細(xì)胞癌細(xì)胞的能力，探討膀胱癌治療的新方法。
　　 方法：MTT法檢測(cè)CELECOXIB不同濃度，不同時(shí)間對(duì)T24和HUVEC細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制。相差顯微鏡觀察CELECOXIB對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。熒光顯微鏡下觀察ZD55-EGFP對(duì)T24和HUVEC細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。RT-PCR法測(cè)定IL-24mRNA在不同細(xì)胞中的表達(dá)情況。MTT法檢測(cè)CELECOXIB聯(lián)合Z

2、D55-IL-24對(duì)T24和HUVEC細(xì)胞增殖的抑制作用。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其對(duì)T24和HUVEC凋亡的影響。所得數(shù)據(jù)使用SAS統(tǒng)計(jì)軟件分析。
　　 結(jié)果：CELECOXIB對(duì)T24細(xì)胞有明顯抑制作用，而對(duì)HUVEC細(xì)胞抑制作用不明顯。這種抑制有劑量和時(shí)間依賴性。同HUVEC細(xì)胞組、空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。CELECOXIB處理48h后，T24貼壁細(xì)胞漸減少。細(xì)胞核皺縮、靠邊。但是HUVNEC細(xì)胞形態(tài)變化不明顯。0.

3、5感染復(fù)數(shù)的ZD55-EGFP在感染細(xì)胞24小時(shí)后可觀察到不同強(qiáng)度的熒光。隨時(shí)間的增加，熒光強(qiáng)度也增加。但是，在相同時(shí)間下T24細(xì)胞中的熒光強(qiáng)度明顯高于HUVEC細(xì)胞。RT-PCR結(jié)果表明，ZD55-IL-24轉(zhuǎn)染細(xì)胞后相同時(shí)間下。T24中IL-24mRNA表達(dá)量高于HUVEC中(P<0.05)。T24細(xì)胞組中聯(lián)合用藥組抑制率明顯高于其它組，且呈時(shí)間依賴性。差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。T24細(xì)胞各組的抑制率也明顯高于HUVEC組(

4、P<0.05)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示T24細(xì)胞組中，聯(lián)合用藥組凋亡率最高。T24細(xì)胞組凋亡率明顯高于HUVEC組(P<0.01)。
　　 結(jié)論：CELECOXIB對(duì)尿路上皮癌T24細(xì)胞具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，且抑制作用具有時(shí)間劑量依賴關(guān)系。ZD55能夠轉(zhuǎn)染T24尿路上皮癌細(xì)胞和HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，但對(duì)T24細(xì)胞具有較高轉(zhuǎn)染效率。ZD55-IL-24轉(zhuǎn)染后T24細(xì)胞能持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)IL-24。與單一藥物相比，CELECOX