PPAR-γ配體激動劑對哮喘患者T淋巴細胞IL-4-STAT6信號通路的影響及機制.pdf

1、目的：探討過氧化物酶體增殖活化體受體-γ(PPAR-γ)配體激動劑對哮喘患者T淋巴細胞白介素4/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活6(IL-4/STAT6)信號通路的影響及可能機制。 方法：選取哮喘患者和健康對照者各10名，抽取哮喘患者外周血30mL，健康者外周10mL，分離出的PBMC，加含RPMI-1640培養(yǎng)基、10﹪胎牛血清、萬分之三谷氨酰胺、100U/mL青霉素、100U/mL鏈霉素和50μg/mL的PHA(簡稱完全培養(yǎng)基)，用完全

2、培養(yǎng)基制成PBMC細胞懸液，貼壁培養(yǎng)4h(于飽和濕度、37℃、含5﹪CO<,2>培養(yǎng)箱中培養(yǎng))。然后從貼壁后的PBMC中取出懸浮的T淋巴細胞如下分組(調(diào)整細胞濃度為1×10<'6>/mL、 2mL/孔)：A組：健康對照者組；B組：哮喘原液組；C組：哮喘IL-4RAb(終濃度為2.5μg/mL)組；D組：哮喘Rosiglitazone(終濃度為100mmol/ml)組；E組：哮喘IL-4 RAb(終濃度為2.5μg/mL)+Rosigli

3、tazone(終濃度為100mmol/ml)組。其中，C組和E組先加IL-4RAb培養(yǎng)1小時(讓IL-4RAb與IL-4R充分結(jié)合而阻斷IL-4與IL-4 R結(jié)合)；再將Rosiglitazone加入D組和E組培養(yǎng)。然后上述各組細胞在培養(yǎng)箱中再培養(yǎng)48h。每組分別同時都用完全培養(yǎng)基作空白對照。培養(yǎng)結(jié)束后用ELISA法測定T淋巴細胞培養(yǎng)上清液IL-4濃度，用Western blot法檢測T淋巴細胞內(nèi)STAT6磷酸化表達水平。用SPSS12

4、.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，測定值采用均數(shù)±標準差(x±s)表示。在方差齊性基礎(chǔ)上，α=0.05，雙側(cè)P≤0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 1 哮喘患者T淋巴細胞分泌的IL-4水平及T淋巴細胞的STAT6磷酸化表達平均高于健康者； 2哮喘T淋巴細胞通過增加分泌的IL-4而促進T淋巴細胞STAT6磷酸化的表達； 3 Rosiglitazone和IL-4R Ab均能降低哮喘患者T淋巴細胞分泌IL-4和T淋巴細胞ST