關于雌激素受體在人涎腺腫瘤和舌癌細胞的表達的研究.pdf

1、雌激素制劑目前在臨床上被廣泛應用于治療女性更年期綜合征、晚期乳腺癌、前列腺癌；預防老年癡呆、心血管疾病、骨質疏松；還有美容和保健等?？墒?，越來越多的研究表明雌激素具有促進腫瘤細胞增殖、轉移的潛在危險。雌激素在體內主要與其受體(ER)結合來發(fā)揮生物學作用。ER屬甾體激素受體超家族成員，是存在于細胞核與胞漿中的一種對雌激素有高度親合力的蛋白質。ER有ERα和ERβ兩種亞型，兩者既相似又有區(qū)別，ERα、ERβ表達比例是決定細胞對雌激素藥物和雌

2、激素拮抗藥反應的重要因素。有研究表明ERα和ERβ比例的改變可能與腫瘤的發(fā)生、惡性程度和轉移潛能有關，此類研究尚處于初始階段。以前的研究大多數圍繞性器官乳腺、卵巢、子宮腫瘤，按照ER的多寡，人們將腫瘤劃分為激素依賴性和非依賴性兩種。如此就把腫瘤細胞內激素受體含量水平，視為預測內分泌治療效果及判斷預后的指征，有報道指出ER水平也可反映腫瘤組織學分型和惡性程度。 人們發(fā)現(xiàn)除生殖系統(tǒng)腫瘤外，胃癌、結腸直腸癌、肝癌、胰腺癌、食管鱗癌、肺

3、鱗癌、黑色素瘤及皮膚腫瘤等許多組織中有不同程度的雌激素受體存在。提示這些腫瘤可能是激素依賴性腫瘤，其產生、發(fā)展受到雌激素的調控。ER的檢測為惡性腫瘤的診斷、預后判斷提供了一定依據，對于ER陽性的腫瘤聯(lián)合應用內分泌治療有著良好的前景。 口腔涎腺腫瘤和鱗癌發(fā)病因素多樣，內分泌失調是原因之一，其發(fā)生發(fā)展是否受到ER的調控國內外未見詳細報道?？谇活M面部腫瘤的治療目前仍以傳統(tǒng)的手術結合放療和化療，沒有較理想的方法判斷其預后。本實驗室以往研

4、究表明雌激素能促進人粘液表皮樣癌細胞的增殖和轉移，并且這種作用可被其受體阻滯劑Tamoxifen阻滯；董紀軍等研究發(fā)現(xiàn)生理劑量E2對人腺樣囊性癌SAcc83細胞有明顯的促增殖和轉移作用，認為E2的臨床應用應該慎重。劉亞莉等發(fā)現(xiàn)E2對舌癌細胞的增殖分化有顯著的調控作用。本研究以涎腺粘液表皮樣癌，腺樣囊性癌和舌癌為例，選取MEC-1及其高轉移株Mc3；Tca8113及其腦轉移株Tb；ACC-2及其肺轉移株ACC-M，運用免疫細胞化學方法、R

5、T-PCR方法、流式細胞儀結合活細胞免疫熒光技術和Western蛋白印跡技術分別從mRNA水平和蛋白水平對ER在這些腫瘤細胞中的ER表達進行定性和半定量分析，并對不同腫瘤細胞之間ER含量高低進行橫向比較。 實驗結果： 1.免疫細胞化學結果顯示ER免疫陽性物質主要存在于細胞核中，少量存在于胞漿。舌癌細胞染色強，陽性細胞數多；腺樣囊性癌細胞著色較淡，接近陰性；粘液表皮樣癌細胞染色和陽性細胞數與舌癌細胞接近。 2.RT

6、-PCR結果顯示除ACC-M均為陰性外，其它細胞系ERαmRNA和ERβmRNA均有表達，但陽性條帶亮度有所不同。應用圖像分析軟件進行灰度值半定量分析：ERαmRNA表達量由高到低依次為Tb、Tca8113、Mc3、MEC-1和ACC-2，其中TbERα表達量略高于陽性對照細胞T-47D。ERαmRNA/ERβmRNA比值的改變在舌癌中轉移株與其原始腫瘤株相比是升高的；在粘液表皮樣癌和腺樣囊性癌中轉移株與其原始腫瘤株相比ERα/ERβ比

7、值是降低的。結合以往研究認為ERαmRNA/ERβmRNA比值的降低可能和腫瘤的轉移潛能有關。 3.流式細胞技術檢測ER抗原：ER陽性率分別為：舌癌Tca8113為78.7％，Tb為95.1％；粘液表皮樣癌MEC-1為74.6％，Mc3為77.2％；腺樣囊性癌ACC-2為16.7％，ACC-M為2.1％。ACC-M的ER小于5％，為陰性。以每種細胞的陽性百分率和其自身陰性對照熒光率之差作為比較不同細胞之間ER表達的相對參數。ER

8、陽性率由高到低依次為Tb、Tca8113、Mc3、MEC-1和ACC-2。 4.Weternblotting結果顯示人舌癌細胞和粘液表皮樣癌細胞中均有ER蛋白的表達，而腺樣囊性癌細胞中ER蛋白表達極弱，其肺轉移株ACC-M表達呈陰性，與前幾種方法結果相符合。 本實驗運用不同方法所得結果基本一致。組織中性激素受體的有無及多少是判斷患者腫瘤與性激素依賴關系的依據。粘液表皮樣癌、舌癌細胞中ER的較高表達說明這些腫瘤對雌激素有一

9、定的依賴性，對這些腫瘤采取內分泌治療可能有效。腺樣囊性癌雖然組織學上與乳腺腺樣囊性癌很相像，但是ER表達很低或為陰性，一方面說明雌激素對腺樣囊性癌細胞的促增殖、轉移作用可能通過其非受體途徑完成，另一方面ER的缺失可能反映了腫瘤細胞的去分化特征。本研究結果表明ER可能與舌癌、粘液表皮洋癌的發(fā)生、發(fā)展、轉移有關，并為口腔頜面部腫瘤的病因學研究以及臨床治療提供新的思路。ERα、ERβ的檢測能否作為口腔腫瘤惡性程度、轉移潛能和判斷其預后的標志，