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1、目的:建立制備色譜層析系統(tǒng)制備左旋多巴類似物(簡稱:LDA)對照品的方法;探索從貓豆中提取分離純化LDA的工藝并進行優(yōu)化;確證LDA的化學結(jié)構(gòu);對其理化常數(shù)、鑒別及含量測定方法進行研究;開展LDA鎮(zhèn)靜催眠作用的藥理學研究。 方法:采用制備色譜層析系統(tǒng)(AKTA Explorer 100)從貓豆分離純化LDA對照品,并以高效液相色譜儀對其純度進行測定;以LDA的含量為指標,運用正交實驗法對滲漉提取、陽離子和陰離子樹脂分離工藝條件進
2、行優(yōu)選;采用水溶醇沉法對LDA粗品進行純化;通過測定分析紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜和核磁共振確證了LDA的結(jié)構(gòu);測定了其理化常數(shù)并建立了鑒別和HPLC測定含量的方法;采用小鼠自主活動法、戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗法、延長戊巴比妥鈉睡眠時間法和抗硝酸士的寧致驚厥實驗法觀察LDA的鎮(zhèn)靜催眠和抗驚厥作用。 結(jié)果:建立了制備色譜層析系統(tǒng)(AKTA Explorer 100)從貓豆中分離純化LDA的方法,產(chǎn)品經(jīng)HPLC檢測,純度達到98.0
3、96以上。優(yōu)選出從貓豆?jié)B漉提取LDA的條件為: 50倍量濃度為0.1mol/L的鹽酸溶液以15ml/min的滲漉速度滲漉提??;陽離子樹脂分離條件為:150倍量1%氨水,洗脫速度5ml/min,洗脫率60.94%;陰離子樹脂分離條件為:50倍量1%氨水,洗脫速度3mL/min,洗脫率63.46%。LDA粗品在乙醇中結(jié)晶后得到LDA精品,純度達到98%。通過對紫外、紅外、質(zhì)譜和核磁共振圖譜解析,確證LDA化學名為:1,2-二氫-3-胍基-6
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