天舒浸膏對急性腦缺血再灌注損傷的保護作用與機制研究.pdf

1、背景與目的
　　 腦血管病是嚴重威脅人類尤其是中老年人健康的常見病、多發(fā)病，具有高發(fā)病率、高致殘率和高致死率，其中87％是缺血性腦血管病[1]。腦缺血再灌注損傷是缺血性梗死腦區(qū)在血液供應恢復后出現(xiàn)的更嚴重的腦損傷，其損傷發(fā)生機制比較復雜，活性氧增多、炎癥反應、內(nèi)皮細胞損傷、鈣超載、細胞凋亡增加等多種因素均參與缺血再灌注損傷過程，抑制再灌注損傷是治療缺血性腦血管病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。盡管國內(nèi)外研究者對此進行了大量的研究并取得一定進展，但仍

2、缺乏有針對性的治療策略[2，3]。
　　 中醫(yī)藥治療缺血性腦血管病已有悠久的歷史，具有作用較強、副作用小、藥理作用廣泛等優(yōu)點，可以從多個層次和多個環(huán)節(jié)上起到治療作用，特別適合腦缺血所致的多種病理改變。長期臨床實踐中產(chǎn)生的腦缺血的經(jīng)典理論、中藥提取物和中藥復方日益引起國內(nèi)外學者的關(guān)注[4，5]。
　　 缺血性腦血管病與中醫(yī)血瘀證緊密相關(guān)，中醫(yī)治療多采用活血化瘀法，配伍理氣藥以行氣活血。在傳統(tǒng)中醫(yī)理論指導下產(chǎn)生的中藥復方天舒

3、膠囊，其處方來源于宋代《圣濟總錄》中的大川芎方，應用現(xiàn)代科技提取天麻、川芎的有效成分天麻素、川芎嗪精制而成，具有活血化瘀、平肝熄風、通絡(luò)止痛等功效。中藥復方是針對某一病癥發(fā)揮藥效作用的全部活性藥效物質(zhì)總和，是中藥復方藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，正是多味藥物的組合構(gòu)成了中藥復方的多靶點效應和協(xié)同作用[6]。而對于天舒膠囊，以往的文獻多關(guān)注于其對頭痛的治療，本課題擬初步觀察其對急性腦缺血損傷的保護作用，并進一步探討其分子機制，以期為拓展天舒膠囊的臨床應

4、用提供客觀理論依據(jù)。
　　 方法
　　 本課題采用SD成年雄性大鼠作為實驗動物，研究短期天舒浸膏預處理對局灶性腦缺血再灌注損傷的保護效應及其分子機制。將大鼠隨機分為假手術(shù)組(sham)、模型組(I/R)、天舒浸膏0.3g/kg/d、0.6g/kg/d、1.28/kg/d劑量組(TS0.3、TS0.6、TS1.2)，分別灌胃給予天舒浸膏和生理鹽水，每日1次，連續(xù)7天。末次灌胃給藥后2h根據(jù)改良的Zea-Longa[15]線

5、栓法制作大腦中動脈栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，90min后實施再灌注。造模后24h觀察各組動物的一般精神行為狀態(tài)及生存情況。采用TTC染色于缺血再灌注后24h計算腦梗死體積，同時測定腦組織含水量；參照改良神經(jīng)功能損害評分(modified Neurological Severity Scores，mNSS)于缺血再灌注后1d、3d、7d、14d進行神經(jīng)功能缺損評分；并對腦組織進

6、行灌流切片，采用HE、Nissl染色法觀察缺血再灌注后24h的腦組織損傷；應用TUNEL法觀察缺血再灌注后1d梗死灶周的凋亡細胞數(shù)；采用ELISA法檢測再灌注24h磷酸肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)表達；采用Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的活性以及Bax/Bcl-2的表達。
　　 結(jié)果
　　 0.6-1.2g/kg/d天舒浸膏預處理組動物次日精神狀態(tài)較好，對水和食物的攝取有較強的主動性；能顯

7、著減少腦梗死體積，降低缺血再灌注損傷后的腦組織含水量；改善神經(jīng)功能缺損癥狀；血清CK-BB的水平顯著降低，減少細胞凋亡，抑制缺血后Bax表達上調(diào)和Bcl-2表達下調(diào)，進而調(diào)節(jié)Bax/Bcl-2表達比值，并抑制Caspase-3活性。
　　 結(jié)論
　　 天舒浸膏可能通過抑制腦缺血后的細胞凋亡，減少腦梗死體積，降低血清CK-BB水平，減輕神經(jīng)細胞損傷，促進神經(jīng)功能恢復，機制與對Bax/Bcl-2比值的調(diào)節(jié)和對Caspase-