慢性溫和非預期性應激誘導C3H-HeJ鼠皮膚組織免疫紊亂和細胞凋亡.pdf

1、目的：⑴建立慢性溫和非預期性應激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型,觀察慢性溫和非預期性應激對C3H/HeJ鼠皮膚組織的影響。⑵研究小鼠皮膚組織中免疫相關細胞因子TNF-α、IL-1β、IL6和細胞凋亡相關蛋白Bax、Bcl-2在心理應激過程中的變化。⑶探討心理應激誘導皮膚組織免疫紊亂和細胞凋亡的機制,為治療斑禿疾病提供新的思路和實驗依據(jù)。
　　方法：①采用C3H/HeJ雌鼠建立C

2、UMS模型,與對照組(Control組)比較,觀察心理應激組小鼠體重和行為學變化以及心理應激對小鼠皮膚組織的影響。②在上述實驗基礎上加入腹腔注射抗氧化劑組,把所有實驗小鼠隨機分成 Control組、CUMS組和CUMS+抗氧化劑組(Tempol組)三組。在施加21天心理應激后,對三組小鼠進行體重測量和行為學評估,檢測小鼠血漿皮質酮水平,觀察小鼠皮膚組織學切片,用免疫組織化學染色的方法觀察皮膚組織中免疫相關細胞因子TNF-α、IL-1β、

3、IL6的表達并用Elisa試劑盒進行定量檢測,再用Western Blot方法檢測皮膚組織中凋亡相關蛋白Bax和Bcl-2的表達。
　　結果：⑴小鼠體重變化:與Control組相比,CUMS組和Tempol組的小鼠體重顯著降低(P<0.01);Tempol組的小鼠體重相對于CUMS組也有明顯降低(P<0.05)。⑵行為學評估:在3分鐘曠場實驗中,CUMS組與Tempol組小鼠的總運動距離和修飾行為次數(shù)明顯少于 Control組小鼠

4、(P<0.01),靜止時間明顯多于Control組小鼠(P<0.01)。⑶血漿皮質酮:CUMS組與Tempol組小鼠的血漿皮質酮含量顯著高于Control組小鼠(P<0.01)。⑷CUMS組小鼠皮膚組織中出現(xiàn)了大量炎性細胞聚集現(xiàn)象,Tempol組和 Control組小鼠只有少量聚集或者沒有出現(xiàn)。⑸免疫相關細胞因子:CUMS組小鼠皮膚組織中免疫相關細胞因子TNF-α、IL1β、IL6的含量顯著高于Control組小鼠(P<0.05)與Te

5、mpol組小鼠(P<0.05)。⑹細胞凋亡相關蛋白:CUMS組小鼠皮膚組織中促凋亡蛋白Bax的表達量顯著高于Control組小鼠(P<0.05)與Tempol組小鼠(P<0.05),三組小鼠皮膚組織中抑凋亡蛋白Bcl-2的表達量無顯著差異。
　　結論：①慢性溫和非預期性應激模型是研究疾病發(fā)生機制中心理因素作用的最適宜模型。②慢性溫和非預期性應激誘導了C3H/HeJ鼠皮膚組織的免疫紊亂,造成TNF-α、IL-1β、IL6等免疫細胞因