DNA甲基轉移酶3a和羥脯氨酸在鹽酸異丙腎上腺素致大鼠心肌纖維化中的作用機制研究.pdf

1、目的：心房顫動(atrial fibrillation,AF)是臨床上最常見的快速型室上性心律失常之一,對于心房顫動的發(fā)生機制一直是國內外心血管領域內的研究熱點之一,心房顫動與心肌纖維化之間存在相關性已經(jīng)被證明。本實驗旨在研究維持心房顫動發(fā)生和發(fā)展的重要機制-心肌纖維化的發(fā)生發(fā)展過程,探討 DNMT3a和Hyp在異丙腎上腺素(Isoprenaline,ISO)誘導的大鼠心肌纖維化中的表達的變化以及相關性研究。
　　方法：利用皮下注

2、射ISO制備大鼠心肌纖維化模型,隨機將40只雄性SD大鼠等分為空白對照組和模型組,每組20只。其中模型組給予皮下注射ISO5mg/kg·d、空白對照組給予等劑量生理鹽水皮下注射,連續(xù)注射7天后,進食不禁水12小時,稱體重后處死大鼠獲取抗凝血液標本,離心,獲取上清,取下心臟,稱重記錄,分別獲取心肌組織標本。計算心重指數(shù)(HW/BW)和左心室重指數(shù)(LVW/BW);HE染色和Masson染色法觀察心肌組織的纖維化程度并計算膠原容積分數(shù)(CV

3、F);應用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒測定模型組和空白對照組血清中I型膠原和III型膠原的含量;Western blot法測定模型組和空白對照組大鼠心肌組織中DNMT3a和α-SMA的蛋白表達;利用羥脯氨酸試劑盒測定模型組和空白對照組大鼠心肌組織中羥脯氨酸(Hydroxproline,Hyp)的含量,并分析DNMT3a和Hyp之間的相關性。
　　結果：皮下注射ISO7天后,稱重并計算后發(fā)現(xiàn)模型組大鼠心重指數(shù)(HW/BW)和左心室重指數(shù)(LV

4、W/BW)與空白對照組相比較明顯增加(P<0.05),說明心臟出現(xiàn)了明顯的纖維化,并以左室為主;模型組大鼠血清標本中I型膠原和III型膠原的含量較空白對照組明顯增加(P<0.05);HE染色和Masson染色顯示模型組大鼠心肌組織間質中出現(xiàn)了明顯的膠原纖維增生;計算心肌間質膠原容積分數(shù)(CVF)較對照組增加;Western blot法檢測結果顯示模型組大鼠心肌組織中 DNMT3a和α-SMA的表達明顯高于空白對照組(P<0.05);同時