家蠅幼蟲凝集素的分離純化及其抑制MCF-7細胞活性的研究.pdf

1、家蠅幼蟲血淋巴粗提液經過親和層析，分離出3種與D-半乳糖特異性結合的蛋白，經高效液相色譜和聚丙烯酰胺凝膠電泳，分離出分子質量為38 ku的家蠅幼蟲凝集素(MLL-2)，該組分具有明顯的凝血活性，并且MLL-2是一種熱敏感型凝集素。圓二CD色譜結果表明，MLL-2的二級結構主要是以β折疊和無規(guī)卷曲的構象存在。MTT實驗結果顯示，MLL-2對人乳腺癌MCF-7細胞的生長具有明顯的抑制作用，其抑制效果具有時間和濃度依賴性。通過HE染色、Hoc

2、hest33258染色和吖啶橙染色從形態(tài)學上表明，MLL-2處理過的人乳腺癌MCF-7細胞出現(xiàn)凋亡小體、染色質濃縮等典型的凋亡現(xiàn)象。MLL-2處理過的人乳腺癌MCF-7細胞經TNUEL檢測出DNA鏈斷裂，證明發(fā)生凋亡現(xiàn)象。經流式細胞儀分析人乳腺癌MCF-7細胞被阻遏在G2/M期，并且凋亡細胞隨作用時間的延長而增加。在人乳腺癌MCF-7細胞凋亡過程中，作為線粒體途徑信使的Ca2+明顯增加，并且線粒體途徑上游的p53蛋白、中游的Bcl-2/