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文檔簡介
1、心血管疾病(Cardiovascular disease,CVD)被喻為人類健康的第一大殺手,全球每年死于心血管疾病的人數(shù)約占全球死亡人數(shù)的三分之一。動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,As)及其并發(fā)癥占了心血管疾病中相當大一部分。氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,oxLDL)通過多種途徑促進動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展,是As病灶中特有的成份,兩者關系密切。對oxLDL的檢測成為
2、CVD診斷的一個較為敏感的指標,對病人疾病的診斷和預防都有積極的意義。 目前檢測oxLDL的方法最常用的是采用oxLDL單抗的酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。膠體金快速免疫層析法(Colloidal gold enhanced immunochromatography assay,CGEIA)運用于快速診斷具有與ELISA相近敏感度,也借助單克隆抗體技術使其特異性
3、得到保障。并同時能解決ELISA操作過程相對復雜,操作時間長,檢測費用較高等缺點。 本實驗通過B淋巴細胞雜交瘤技術成功建立了兩株能穩(wěn)定分泌抗人oxLDL單克隆抗體的細胞株:A3和E11。通過小鼠腹水誘導產生,飽和硫酸銨沉淀法提純的兩株單抗均有1:25600以上的效價,其中單抗A3的相對親和力較E11更高。經亞類試劑盒鑒定,兩株單抗均為IgM。同時,通過實驗掌握了膠體金的制備方法,制得膠體金清涼透明,經紫外分光光度計及透射電鏡檢測
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