干擾素誘導(dǎo)胸苷磷酸化酶表達(dá)對氟尿嘧啶類藥物抗胃癌活性的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：探討干擾素(IFN)在胃癌MKN45細(xì)胞中對胸苷磷酸化酶(TP)表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及其對5-氟尿嘧啶抗癌作用的影響。 方法：分別用RT-PCR和Western blot檢測不同濃度的干擾素-γ(IFN-γ)和不同作用時間誘導(dǎo)后TP mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)，MTT法確定5-氟尿嘧啶對胃癌MKN45細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，流式細(xì)胞技術(shù)分析5-氟尿嘧啶和IFN-γ處理后的腫瘤細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：以0、3000、6000和12000

2、IU/ml IFN-γ處理的細(xì)胞TPmRNA表達(dá)量分別為0.4993±0.0206、0.571 6±0.0248、0.8062±0.0280和0.8182±0.0272。Werstern blot結(jié)果顯示，0、3000、6000和12000IU/ml IFN處理組中TP蛋白表達(dá)依次增強，分別為0.5780±0.0133、0.6437±0.0557、0.8027±0.0235和0.8144±0.0314。TP mRNA和TP蛋白的表達(dá)隨I

3、FN劑量的增加而增強，但至6000IU/ml后再無明顯增強。IFN作用不同時間后，提示TP mRNA表達(dá)逐漸增強，呈時間依賴性，48hrs組較0h，8h，16h，24h各組均強且差異有統(tǒng)計學(xué)意義，但與72h組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。IFN-γ增強胃癌MKN45細(xì)胞表達(dá)TP，并呈時間和劑量依賴性，在6000IU和48小時誘導(dǎo)表達(dá)效果最好。IFN-γ與5-氟尿嘧啶聯(lián)合應(yīng)用可使5-氟尿嘧啶對胃癌MKN45細(xì)胞半數(shù)致死量(IC50)從(13.3448