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1、目的:以人外周血單個核細胞為前體細胞,誘導出樹突狀細胞,經(jīng)結(jié)腸癌細胞抗原修飾,并經(jīng)活化T淋巴細胞,觀察T淋巴細胞對結(jié)腸癌細胞的殺傷效應。 方法:取確診為結(jié)腸腺癌的病人手術(shù)標本,體外分離和培養(yǎng)出結(jié)腸癌細胞,并用流式細胞儀和免疫組化鑒定:分離該病人外周血單個核細胞,聯(lián)合應用粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、白細胞介素-4體外誘導為樹突狀細胞;培養(yǎng)樹突狀細胞第5天用同一病人結(jié)腸癌細胞凍融抗原以不同時間(24h,36h,48h)修飾樹突狀細
2、胞,并經(jīng)流式細胞儀進行表型鑒定;樹突狀細胞與T淋巴細胞共孵(共孵時間12h、24h、36h、48h)以活化T淋巴細胞,體外觀察T淋巴細胞對結(jié)腸癌細胞的殺傷作用。 結(jié)果:培養(yǎng)出結(jié)腸癌細胞。通過外周血單個核細胞成功誘導出表達CD11c,CD80,HLA-DR分子的樹突狀細胞,經(jīng)腫瘤抗原修飾后,其表達上調(diào)。培養(yǎng)第5天通過結(jié)腸癌細胞凍融抗原以不同時間(24h,36h,48h)修飾樹突狀細胞,以及不同時間(12h,24h,36h,48h)
3、與T淋巴細胞共孵后對結(jié)腸癌細胞殺傷率的不同,說明誘導出的樹突狀細胞在體外有刺激T淋巴細胞增殖的活性,其活性在加凍融抗原修飾36h以及與T淋巴細胞共孵36h時最高。 結(jié)論: 1.分離人外周血單個核細胞,聯(lián)合應用粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、自細胞介素-4,第5天加腫瘤抗原修飾樹突狀細胞36h后在體外能夠誘導出成熟的高表達CD11c,CD80,HLA-DR分子的樹突狀細胞。 2.腫瘤抗原修飾的樹突狀細胞在體外有刺激T
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