淫羊藿有效成分分析及其體內代謝的研究.pdf

1、淫羊藿(Epimedii Folium)是小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornumMaxim.、箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.、巫山淫羊蓉Epimedium wushanense T.S.Ying或朝鮮淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥葉,具有“補腎陽,強筋骨,祛風濕”

2、的傳統(tǒng)功效?，F(xiàn)代藥理研究表明,淫羊藿能增加心腦血管血流量,改善生殖系統(tǒng)功能,促進造血功能、免疫功能及骨代謝,具有抗衰老、抗腫瘤等功效。淫羊藿化學成分研究表明,其主要成分是異戊烯基黃酮,如淫羊藿苷,寶藿苷Ⅰ等。中國藥典也采用測定淫羊藿藥材或飲片中的淫羊藿苷和寶藿苷Ⅰ的含量對淫羊藿進行質量控制。
　　 本論文首先建立了一個快速、準確、便捷的高效液相色譜-紫外檢測器-傅里葉變換離子回旋共振質譜技術(HPLC-UV/FTICRMS)的方

3、法,對7種不同來源的淫羊藿藥材中的黃酮成分進行在線分析檢測,得到了這些化合物準分子離子的高分辨質量數(shù),測定精確質量數(shù)準確度均小于2 ppm,并通過采用Data Dependent Scan模式獲得準分子離子峰的多級質譜碎片的數(shù)據(jù)。通過準分子離子的高分辨數(shù)據(jù)計算了其分子組成,并結合多級碎裂質譜碎片的數(shù)據(jù)及淫羊藿異戊烯基黃酮的質譜裂解規(guī)律,鑒定和推測了淫羊藿藥材中68種黃酮成分的結構。通過高分辨質譜提取離子流獲得的峰面積數(shù)據(jù),明確了這68種

4、淫羊藿黃酮成分中最主要的黃酮成分。接著通過高效液相色譜-質譜聯(lián)用(HPLC-MS)技術,對7個主要淫羊藿黃酮成分(朝藿定A,B,C,淫羊藿苷,2”-O-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ,箭藿苷B和寶藿苷Ⅰ)進行定量分析,一共分析了35個不同來源不同產地的淫羊藿藥材。采用主成分分析(PCA)方法和聚類分析方法分別對定量分析結果進行了統(tǒng)計學處理。通過PCA分析構建了一個綜合評價函數(shù),結果表明該評價函數(shù)不但可以反映總黃酮含量的高低,而且可以反映不同黃酮成

5、分相對含量的變化,是一個具有前景的中藥材質量評價方法。聚類分析表明,不同來源淫羊藿藥材按照黃酮含量的高低可以分為低、中、高三個組,分類結果與綜合評價函數(shù)所得結果一致。實驗結果表明在質量評價上,應該采用多成分同時定量的方法評價淫羊藿的質量,并選擇合適的統(tǒng)計處理方法,構建質量評價指標。
　　 本論文運用HPLC-FTICRMS分析技術,分析檢測了大鼠口服朝鮮淫羊藿水提物后體內有效成分及其代謝產物,得到了這些化合物分子離子和多級碎裂的

6、碎片離子的高分辨質量數(shù)和多級質譜信息,測定精確質量數(shù)準確度均小于3 ppm,計算了分子組成；依據(jù)多級質譜數(shù)據(jù),總結質譜裂解規(guī)律,共分析和鑒定了大鼠體內出現(xiàn)的9個黃酮類成分,其中3個首次在大鼠體內發(fā)現(xiàn)。通過比較給藥液和體內生物樣本的差異,推斷了淫羊藿總黃酮在大鼠體內可能的代謝途徑。通過代謝產物的鑒定和代謝途徑的研究,證實了淫羊藿異戊烯基黃酮的體內代謝轉換主要是Ⅰ相代謝(去糖基化),以及進一步發(fā)生的Ⅱ相代謝(乙?；?。
　　 基于藥

7、材中主要藥效成分的定量分析和大鼠體內代謝產物研究鑒定的結果,選擇大鼠體內出現(xiàn)的主要7個黃酮類成分作為研究對象,建立了超高效液相色譜與串聯(lián)四級桿質譜聯(lián)用(UHPLC-MS/MS)的分析方法進行大鼠體內代謝指紋圖譜的研究,研究結果表明,7個主要的黃酮成分均廣泛分布于大鼠不同的組織臟器中,可以代表淫羊藿藥材在體內物質基礎變化情況,是淫羊藿體內的重要藥效物質。另外研究結果也表明,色譜指紋圖譜不同的兩類淫羊藿,其體內代謝指紋圖譜也明顯不同。