米團花多糖的分離純化,結構鑒定及體外抗氧化活性分析.pdf

1、本研究以米團花為對象，優(yōu)化了超聲波提取米團花多糖的工藝條件；對米團花多糖進行了分離、純化及結構鑒定；同時測定了米團花多糖的體外抗氧化活性。
　　（1)為了優(yōu)化米團花多糖提取率，通過Box-Behnken試驗設計，選取超聲功率、料液比、超聲時間作為優(yōu)化因素，采用響應面分析法對超聲波提取米團花多糖工藝進行了優(yōu)化。結果顯示：超聲功率和超聲時間對米團花多糖得率有顯著性影響。超聲波提取米團花多糖的最佳工藝條件為：超聲功率548 W，料液比1

2、:30 g/mL，超聲時間55 min，最佳提取率為17.59％，與預測值17.74%擬合性較好。
　?。?）采用膜分離技術截留多糖，納濾除去色素，單糖等小分子量物質；Sevage法除蛋白質；Sephadex LH-20凝膠柱純化。經過純化色素脫除率為98.5%，蛋白脫除率達100%。紫外掃描說明米團花多糖沒有色素及蛋白質；薄層色譜鑒定其為單一物質。
　?。?）高效凝膠色譜法分析米團花多糖分子量及純度，高效液相及超高壓液相Q

3、TOF-MS連用分析米團花多糖中的單糖組份，電鏡掃描分析其表面結構，紅外光譜及核磁共振技術分析其結構。得到了分子量為354813 Da米團花多糖；其單糖成分為甘露糖-鼠李糖-葡萄糖-半乳糖醛酸-阿拉伯糖，摩爾比為：0.19:0.35:0.64:0.26:0.47。紅外及核磁共振對 LCP進行分析，氫譜和碳譜均含有糖類的特征，說明了米團花多糖的構型為β型。
　　（4）為了分析米團花多糖生理活性，對米團花多糖體外抗氧化活性進行了分析。

4、分別測定了米團花多糖對DPPH自由基、羥基（.OH）自由基、超氧自由基（O2-）的清除能力，FeSO4-H2O2-引起的小鼠脂肝脂質過氧化反應、Fe2+-Vc引起的小鼠線粒體腫脹、過氧化自由基（.H2O2）引起的血紅細胞溶血的抑制能力。實驗結果表明：在米團花多糖濃度為1 mg/mL，DPPH、.OH、O2-的清除率分別為85.48%、47.23%、77.68%，IC50值分別為0.44、5.91、0.50 mg/mL，米團花多糖能夠有效