黃芪注射液對大鼠睪丸扭轉復位后保護作用的研究.pdf

1、目的：睪丸扭轉是臨床急癥，好發(fā)于青春期前后的青少年，需行睪丸早期復位以挽救睪丸，然而，復位后常出現(xiàn)不同程度的睪丸萎縮乃至生精功能低下已成為亟待解決的問題。近來研究發(fā)現(xiàn)生精功能損傷與復位后再灌注睪丸中活性氧的產生所致，活性氧族包括過氧化氫(H<,2>O<,2>)、羥基(-OH)、超氧基團(O<,2><'->)等，它們引起細胞膜和線粒體膜脂質過氧化，從而破壞膜的完整性，增加膜的通透性，進而引起睪丸生精細胞損傷及凋亡<'[1]>。扭轉一側睪丸

2、除了造成患側組織的直接損傷以外，還會導致對側睪丸的交感性損傷<'[2]>。對側睪丸損傷的機制可能與對側睪丸的缺血再灌注、免疫因素、神經(jīng)體液因素、血睪屏障有關。本實驗通過睪丸扭轉復位動物模型的建立，旨在探討黃芪注射液對Wistar雄性大鼠睪丸扭轉復位后的保護作用，以研究缺血再灌注(Ischemia-reperfusion)損傷過程中相關酶及產物等生化指標的變化，以及生精細胞凋亡情況的變化，為臨床工作中的睪丸扭轉患者減輕睪丸損傷及保護生精功

3、能提供一定的實驗依據(jù)和理論依據(jù)。 方法：40只成年(6-8周)健康Wistar雄性大鼠隨機分為睪丸扭轉假手術對照組(A組)、睪丸扭轉復位組(B組)、睪丸扭轉復位+單次黃芪注射液治療組(C組)、睪丸扭轉復位+多次黃芪注射液治療組(D組)4個組，每組10只。建立單側睪丸扭轉復位模型。單側睪丸扭轉復位模型采用Tumer 法<'[3]>建立：2％戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔注射麻醉后，下腹小切口，游離左側睪丸，切斷睪丸引帶，分離周圍

4、筋膜至附睪頭。A組：左側陰囊切開，游離暴露睪丸，依扭轉模型隨意搬動，但不予扭轉，陰囊縫合關閉。B組：左側睪丸順時針繞精索旋轉720°，肉膜白膜縫合固定以防止自動復位，陰囊縫合。扭轉6h后復位固定。C組：方法同B組，于扭轉復位前30min(即扭轉后5.5h)腹腔注射黃芪注射液(3g/kg)。D組：方法同B組，除于扭轉復位前 30min 腹腔注射黃芪注射液外，還分別于術后第1天、第2天、第3天腹腔注射黃芪注射液(lg/kg)。扭轉復位術后7

5、天切取雙側睪丸分別留取組織勻漿和石蠟切片的標本待檢測。睪丸組織石蠟包埋切片用末端脫氧核糖核酸轉移酶介導的脫氧尿嘧啶三磷酸原位缺口末端標記法(TUNEL)檢測生殖細胞凋亡，光鏡下每張切片選取5個視野(×200)，計數(shù)100個細胞，求得陽性細胞百分率得到凋亡指數(shù)?；瘜W比色法測定睪丸組織的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。 以上結果均采用X±s表示，所有數(shù)據(jù)均在微機上采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析。采用方法

6、：方差齊性檢驗、單因素方差分析，P值<0.05定為有統(tǒng)計學意義。 結果：雙側睪丸均顯示：1睪丸扭轉復位+單次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉復位組比較：SOD含量明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；MDA含量明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)；生精細胞凋亡指數(shù)明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。 2 睪丸扭轉復位+多次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉復位組比較：SOD含量明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；MDA 含

7、量明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)；生精細胞凋亡指數(shù)明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。 3 扭轉復位+多次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉復位+單次黃芪注射液治療組比較SOD含量明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；MDA含量明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)；生精細胞凋亡指數(shù)明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。 4 睪丸扭轉復位組、睪丸扭轉復位+單次黃芪注射液治療組、睪丸扭轉復位+多次黃芪注射液治療組與